グループA連鎖球菌のEMMおよびSCPA遺伝子のプロモーター配列への活性化因子MGAの特異的結合

グループA連鎖球菌（ガス）連鎖球菌性腫、Mタンパク質（EMM）およびC5Aペプチダーゼ（SCPA）の表面関連毒性因子の転写は、MGA（以前のMRYまたはVirr）と呼ばれるタンパク質によって活性化されます。MGAが調節する遺伝子のプロモーターに直接結合するかどうかを判断するために、MGAのマルトース結合タンパク質のC末端末端への融合に起因するタンパク質を大腸菌から精製しました。型M6ガス株JRS4のSCPAおよびEMM対立遺伝子のプロモーター領域への特異的結合は、DNAタンパク質複合体の電気泳動によって実証されました。競争研究では、SCPAの上流の領域がMBP-MGAをEMMの上流の領域よりもわずかに高い親和性で結合したことが示されました。DNase I保護実験では、両方のプロモーターの-35領域のすぐ上流の1つの45 bp結合部位が特定されました。さまざまな血清型のガス型の株から多くのEMM、SCP、およびEMM様遺伝子のプロモーターで、保護領域に相同性のある配列が見つかり、コンセンサスMGA結合部位が推定されました。

Transcription of the surface-associated virulence factors of the group A streptococcus (GAS) Streptococcus pyogenes, M protein (emm) and the C5a peptidase (scpA), is activated by a protein called Mga (formerly Mry or VirR). To determine whether Mga binds directly to the promoters of the genes it regulates, a protein resulting from the fusion of Mga to the C-terminal end of maltose-binding protein was purified from Escherichia coli. Specific binding to the promoter regions of the scpA and emm alleles of the type M6 GAS strain JRS4 was demonstrated by electrophoresis of the DNA-protein complex. Competition studies showed that the region upstream of scpA bound MBP-Mga with a slightly higher affinity than did the region upstream of emm. DNase I protection experiments identified a single 45-bp binding site immediately upstream of and overlapping the -35 region of both promoters. Sequences homologous to the protected regions were found in the promoters of many emm, scp, and emm-like genes from strains of different serotypes of GAS, and a consensus Mga binding site was deduced.