CD16（FCガンマ受容体III）によるリガンド結合と食作用は、中国のハムスター卵巣細胞における関連するゼータとガンマサブユニットによる貪食シグナル伝達

IgG（FCガンマRIII）の低親和性FCガンマ受容体IIIであるCD16は、ヒト天然キラー細胞およびマクロファージおよびグリコシルホスファチジルイノシトール型形態（FCガンマRiiibまたはFCガンマリアン型のポリペプチド固定型（FCガンマRIIIAまたはCD16A）として存在します。CD16B）好中球で。CD16Aは、FC Epsilon RIのガンマサブユニットまたは細胞表面発現のためにTCR-CD3複合体のゼータサブユニットの関連付けを必要とします。CD16Bは多型であり、2つの対立遺伝子はNa1とNa2と呼ばれます。この研究では、CD16AとCD16Bの2つの対立遺伝子が中国のハムスター卵巣（CHO）細胞とそのリガンド結合および貪食特性で分析されたもので発現しています。CD16Bの2つの対立遺伝子形態は、ヒトIgG1に対して同様の親和性を示しました。ただし、Na1対立遺伝子は、Na2対立遺伝子よりもIgG3に対して約2倍高い親和性を示しました。CD16の3つの形態はすべて、ウサギIgGコーティング赤血球（EA）を効率的に結合しましたが、CD16Aのみがガンマサブユニットの食作用EAと共発現しました。CHO細胞で発現したCD16Aによって媒介される食作用は、二価カチオンに依存しませんが、無傷のマイクロフィラメントに依存していました。CD16A-GAMMAおよびCD16A-ZETAキメラを発現するCHO細胞もEAを貪食しました。食作用は、チロシンキナーゼ阻害剤であるチルホスチン-23によって特異的に阻害されました。要約すると、我々の結果は、グリコシルホスファチジルイノシトールに固定されたCD16B対立遺伝子が食作用を媒介する能力がCD16Aと異なることを示しています。さらに、他のFCガンマRSを使用した研究により、CHO細胞がFCガンマRSの細胞質ドメインによって媒介される貪食経路を欠くことが示されているため、CD16AおよびCD16A-サブユニットキメラを安定してトランスフェクトしたCHO細胞によるEAの食作用は、理想的なシステムを提供することを示しています。これらのFCガンマR関連サブユニットによって媒介される貪食シグナル伝達経路。

CD16, the low affinity Fc gamma receptor III for IgG (Fc gamma RIII), exists as a polypeptide-anchored form (Fc gamma RIIIA or CD16A) in human natural killer cells and macrophages and as a glycosylphosphatidylinositol-anchored form (Fc gamma RIIIB or CD16B) in neutrophils. CD16A requires association of the gamma subunit of Fc epsilon RI or the zeta subunit of the TCR-CD3 complex for cell surface expression. The CD16B is polymorphic and the two alleles are termed NA1 and NA2. In this study, CD16A and the two alleles of CD16B have been expressed in Chinese hamster ovary (CHO) cells and their ligand binding and phagocytic properties analyzed. The two allelic forms of CD16B showed a similar affinity toward human IgG1. However, the NA1 allele showed approximately 2-fold higher affinity for the IgG3 than the NA2 allele. Although all three forms of CD16 efficiently bound rabbit IgG-coated erythrocytes (EA), only CD16A coexpressed with the gamma subunit phagocytosed EA. The phagocytosis mediated by CD16A expressed on CHO cells was independent of divalent cations but dependent on intact microfilaments. CHO cells expressing CD16A-gamma and CD16A-zeta chimeras also phagocytosed EA. The phagocytosis was specifically inhibited by tyrphostin-23, a tyrosine kinase inhibitor. In summary, our results demonstrate that glycosylphosphatidylinositol-anchored CD16B alleles differ from CD16A in their ability to mediate phagocytosis. Furthermore, since studies with other Fc gamma Rs have shown that CHO cells lack the phagocytic pathway mediated by the cytoplasmic domain of Fc gamma Rs, the phagocytosis of EA by CHO cells stably transfected with CD16A and CD16A-subunit chimera provides an ideal system to dissect the phagocytic signaling pathways mediated by these Fc gamma R-associated subunits.