K-glypican：発達中の脳と腎臓で高度に発現する新規GPIに固定されたヘパラン硫酸プロテオグリカン

グリピカンスは、グリコシルホスファチジルイノシトール（GPI）に固定された細胞表面ヘパラン硫酸プロテオグリカン（HSPGS）のファミリーです。現在、発達的に規制されたラット腸転写産物OCI-5、およびセレブログリカンを含むグリピカンを含むグリピカン科は、同様のコアタンパク質サイズとシステイン残基のほぼ完全な保存によって特徴付けられています。シーケンスホモロジーに基づいた縮退オリゴヌクレオチドプライマーを使用したRT-PCRにより、グリピカンファミリーの新規メンバーとグリピカンとOCI-5のマウスホモログをコードするマウスcDNAを分離しました。K-Glypicanという名前の新しい分子は、Glypicanファミリーの他のメンバーと同様に、Heparan硫酸塩鎖の潜在的な付着部位とHeparan硫酸塩鎖の潜在的な付着部位と潜在的な付着部位と潜在的な付着部位を持っています。エピトープタグ付きフルレングスk-グリピカンcDNAのMDCK細胞へのトランスフェクションは、K-Glypicanが実際にGPIアンカーHSPGとして発現していることを示しました。K-Glypican、Glypican、およびOCI-5プローブを使用したノーザンブロット分析により、腎臓と発達の脳が示され、これら3つの分子が細胞型および発達段階特異的発現の顕著なパターンを示すことが示されました。in situハイブリダイゼーションは、発達中の胚におけるK-グリピカン発現の主要な部位が腎臓の尿細管上皮細胞であり、脳の神経上皮細胞の増殖であることを明らかにしました。これらの結果は、K-Glypicanが胚発生に関与する新規GPIアンカーHSPGであることを示しています。

Glypicans are a family of glycosylphosphatidylinositol (GPI)-anchored cell surface heparan sulfate proteoglycans (HSPGs). The glypican family, which currently includes glypican, the developmentally regulated rat intestinal transcript OCI-5, and cerebroglycan, is characterized by a similar core protein size and almost complete conservation of cysteine residues. By RT-PCR using degenerate oligonucleotide primers based on the sequence homologies, we isolated mouse cDNA encoding a novel member of the glypican family as well as mouse homologues of glypican and OCI-5. The novel molecule, named K-glypican, has a predicted molecular mass of 57.5 kD and potential attachment sites for heparan sulfate chains and a GPI anchor in its COOH-terminal region, like other members of the glypican family. Transfection of an epitope-tagged full-length K-glypican cDNA into MDCK cells demonstrated that K-glypican is indeed expressed as a GPI-anchored HSPG. Northern blot analyses with K-glypican, glypican, and OCI-5 probes demonstrated that kidney and developing brain, and that these three molecules show remarkable patterns of cell type- and developmental stage-specific expression. In situ hybridization revealed that the major sites of K-glypican expression in developing embryo are tubular epithelial cells in the kidney and proliferating neuroepithelial cells in the brain. These results indicate that K-glypican is a novel GPI-anchored HSPG involved in embryonic development.