毛細血管クロマトグラフィマス分析によるアラキドン酸エポキシド/ジオールの同定

メチルエステルとしてのアラキドン酸（EETS）のエポキシドレジオイソマーの同定は、ガスクロマトグラフィー中に耐であり、同様の質量スペクトルを持っているため、困難です。本研究では、EETとその加水分解生成物であるジヒドロキシエイコサトリエン酸（DHET）をペンタフルオロベンジルエステル誘導体として分析し、その特性を他のエステルと比較しました。4つのEETレジオエイジョーは、ペンタフルオロベンジル、トリメチルシリル、T-ブチルディメチルシリル、またはメチルエステルなど、ガスクロマトグラフィーによって分解されませんでした。しかし、DHETSに加水分解された後、4つのレジオイソマーのうち3つが（bis）-t-Butyldimethylsilyl Ether、Pentafluorobenzylエステルとして分離されました。4番目のレジオイソマー（5,6-dhet）は、デルタラクトンに変換された後に解決されました。したがって、EETは、一度DHETに変換された毛細血管ガスクロマトグラフィーによって解決できます。EETとDHETの両方のペンタフルオロベンジルエステル（15-40 ng）は、電子イオン化質量分析によって分析された場合、診断スペクトルを提供しました。エポキシドおよびDIOLの位置を示す質量スペクトル解釈は、合成されたEET/DHET [17,17,18,18-D4、5,6,8,9,11,12,14,15 D8]標準を使用して検証されました。負のイオン化学イオン化モードで分析すると、DHETの量（5-150 FG）も分子量を示しました。要約すると、ナノグラム量のEETは、電子イオン化質量分析を使用してペンタフルオロベンジルエステルとして特定されました。フェムトグラムからピコグラムの量のEETは、DHETへの変換後、負のイオン化学イオン化モードでのガスクロマトグラフィマス分析による分析後にも同定されました。

The identification of epoxide regioisomers of arachidonic acid (EETs) as methyl esters is difficult because they coelute during gas chromatography and possess similar mass spectra. In the present study, EETs and their hydrolysis products, dihydroxyeicosatrienoic acids (DHETs), were analyzed as pentafluorobenzyl ester derivatives and their properties were compared to other esters. The four EET regioisomers were not resolved by gas chromatography as pentafluorobenzyl, trimethylsilyl, t-butyldimethylsilyl, or methyl esters. However, after being hydrolyzed to DHETs, three of the four regioisomers were resolved as (bis)-t-butyldimethylsilyl ether, pentafluorobenzyl esters. The fourth regioisomer (5,6-DHET) was resolved after being converted to a delta-lactone. Thus, the EETs could be resolved by capillary gas chromatography once converted to DHETs. Pentafluorobenzyl esters of both EETs and DHETs (15-40 ng) provided diagnostic spectra when analyzed by electron ionization mass spectrometry. The mass spectral interpretations that indicated epoxide and diol positions were validated using synthesized EET/DHET [17,17,18,18-d4, 5,6,8,9,11,12,14,15 d8] standards. Lesser amounts of DHETs (5-150 fg) also indicated molecular weights when analyzed in the negative-ion chemical-ionization mode. In summary, EETs in nanogram quantities were identified as pentafluorobenzyl esters using electron ionization mass spectrometry. EETs in femtogram-to-picogram quantities were also identified after conversion to DHETs and analysis by gas chromatography-mass spectrometry in the negative ion-chemical ionization mode.