ヒトFAS抗原のアポトーシス変異分析に必要な新規タンパク質ドメイン

FAS抗原は、アポトーシスを媒介できる細胞表面タンパク質であり、腫瘍壊死因子受容体ファミリーに属するものです。ヒトFAS抗原を発現するマウス線維芽細胞L929細胞またはT細胞リンパ腫WR19L細胞は、抗ヒトFAS抗体によって濃度依存的に4〜6時間以内に殺されました。細胞質領域にさまざまな変異を持つヒトFAS抗原cDNAが構築され、L929細胞で発現しました。FAS抗原のC末端からの15アミノ酸の欠失は、FAS抗体誘発性の殺害活性を促進しましたが、さらなる欠失はその活性を廃止しました。これは、FAS抗原の細胞質領域における抑制性およびシグナル伝達ドメインの存在を示唆しています。FAS抗原およびI型腫瘍壊死因子受容体で大幅に保存されているシグナルトランスデューシングドメインの68アミノ酸部分は、アポトーシスシグナル伝達に必要な新規タンパク質ドメインであると考えられていました。

The Fas antigen is a cell surface protein that can mediate apoptosis and that belongs to the tumor necrosis factor receptor family. Murine fibroblast L929 cells or T-cell lymphoma WR19L cells expressing the human Fas antigen were killed within 4-6 h by anti-human Fas antibody in a concentration-dependent manner. Human Fas antigen cDNAs with various mutations in the cytoplasmic region were constructed and expressed in L929 cells. A deletion of 15 amino acids from the C terminus of the Fas antigen enhanced the Fas antibody-induced killing activity, whereas a further deletion abolished its activity. This suggests the presence of an inhibitory as well as a signal-transducing domain in the cytoplasmic region of the Fas antigen. A 68-amino acid portion of the signal-transducing domain significantly conserved in the Fas antigen as well as in the type I tumor necrosis factor receptor was considered to be the novel protein domain required for apoptotic signal transduction.