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微小管に影響を与えることが知られている2つの薬物(除去剤であるノコダゾール、および重合および安定化剤であるタキソール)の効果は、ラット下垂体細胞株であるGH3B6プロラクチン(PRL)細胞でテストされています。基底状態では、GH3B6細胞は、細胞質に分岐する束を持つ細胞ケラチン繊維の密度と絡み合った微小管(MT)ネットワークを示しました。ノコダゾールは、細胞周辺でのチューブリンブレブの形成と、サイトケラチンの周核cageの緩みを伴う細胞質のMTの消失を誘発しました。タキソールは、細胞質内のまっすぐなMTバンドルの形成と、サイトケラチンケージの締め付けを誘導しました。並行して、ノコダゾールは、細胞質に分散した小さなサブユニットが分散したように、PRLまたはゴルジ膜抗原であるマンノシダーゼIIであるマンノシダーゼIIに対する抗体で染色した後に現れるゴルジ装置の断片化を誘導しました。タキソールは、ゴルジ装置の摂動を誘発しましたが、それは核の近くに残っていました。驚くべきことに、細胞内組織への明らかな影響にもかかわらず、2つのMT薬は基底およびチロリベリン(TRH)を刺激するPRL放出を混乱させませんでした。さらに、「パルスチェース」実験で評価されているように、それらは細胞内輸送と新シンセ化されたPRLの放出に影響を与えないようです。これらの観察結果は、MTがGH3B6細胞の空間区画化において重要な役割を引き受けているが、合成部位から放出部位への細胞内PRL輸送のさまざまなステップ、および関連膜トラフィックに直接関与していないことを示しています。。
微小管に影響を与えることが知られている2つの薬物(除去剤であるノコダゾール、および重合および安定化剤であるタキソール)の効果は、ラット下垂体細胞株であるGH3B6プロラクチン(PRL)細胞でテストされています。基底状態では、GH3B6細胞は、細胞質に分岐する束を持つ細胞ケラチン繊維の密度と絡み合った微小管(MT)ネットワークを示しました。ノコダゾールは、細胞周辺でのチューブリンブレブの形成と、サイトケラチンの周核cageの緩みを伴う細胞質のMTの消失を誘発しました。タキソールは、細胞質内のまっすぐなMTバンドルの形成と、サイトケラチンケージの締め付けを誘導しました。並行して、ノコダゾールは、細胞質に分散した小さなサブユニットが分散したように、PRLまたはゴルジ膜抗原であるマンノシダーゼIIであるマンノシダーゼIIに対する抗体で染色した後に現れるゴルジ装置の断片化を誘導しました。タキソールは、ゴルジ装置の摂動を誘発しましたが、それは核の近くに残っていました。驚くべきことに、細胞内組織への明らかな影響にもかかわらず、2つのMT薬は基底およびチロリベリン(TRH)を刺激するPRL放出を混乱させませんでした。さらに、「パルスチェース」実験で評価されているように、それらは細胞内輸送と新シンセ化されたPRLの放出に影響を与えないようです。これらの観察結果は、MTがGH3B6細胞の空間区画化において重要な役割を引き受けているが、合成部位から放出部位への細胞内PRL輸送のさまざまなステップ、および関連膜トラフィックに直接関与していないことを示しています。。
The effects of two drugs known to affect microtubules (nocodazole, a depolymerizing agent, and taxol, a polymerizing and stabilizing agent) have been tested in GH3B6 prolactin (PRL) cells, a rat pituitary cell line. Under basal condition, GH3B6 cells displayed a dense and entangled microtubule (MT) network, and a tight perinuclear cage of cytokeratin fibers with branching bundles in the cytoplasm. Nocodazole induced a disappearance of MT in the cytoplasm accompanied by the formation of tubulin blebs at the cell periphery, and a slackening of the perinuclear cage of cytokeratin. Taxol induced the formation of straight MT bundles in the cytoplasm, and a tightening of the cytokeratin cage. In parallel, nocodazole induced a fragmentation of the Golgi apparatus which appeared, after staining with antibodies against PRL or against mannosidase II, a Golgi membrane antigen, as small subunits dispersed in the cytoplasm. Taxol induced a perturbation of the Golgi apparatus which, however, remained located near the nucleus. Surprisingly, despite their obvious effects on the subcellular organization, the two MT drugs did not perturb the basal and thyroliberin (TRH)-stimulated PRL release. Moreover, they do not seem to affect the intracellular transport and release of neosynthesized PRL as appreciated by "pulse-chase" experiments. These observations demonstrate that, although MT assume an important role in the spatial compartmentalization of GH3B6 cells, they are not directly involved in the different steps of the intracellular PRL transport from its synthesis site to its release site, as well as in the associated membrane traffic.
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