ブラジキニンは、別の高親和性ブラジキニンB2受容体を介してモルモット回腸膜のアデニル酸シクラーゼ活性を阻害します

モルモットの回腸膜では、プリ刺激されたアデニル酸シクラーゼ活性は、約30 PMの見かけのIC50値を示すブラジキニンのピコモル濃度によって用量依存的に阻害されました。ナノモルブラジキニン濃度（> 1 nm）では、この効果は減衰しました。回腸アデニル酸シクラーゼの阻害は、ブラジキニンB2受容体拮抗薬HOE 140（D-ARG [HYP3、THI5、D-TIC7、OIC8]ブラジキニン）と百日咳毒素の両方によって完全に予防されました。イレアアデニル酸シクラーゼを阻害するブラジキキニンの効力は、ブラジキニンに対するピコモルの親和性と結合部位とかなり相関しています。さらに、ブラジキニンのナノモル結合親和性を示す2番目の部位が常に発見されました。モルモット回腸膜における2つの独立したブラジキニンB2受容体の発生は、他の3つの証拠によってさらに支持されています：ブラジキニンは、ギニア豚イレウムムムムムに結合して結合して、ブラジキニンがGTP [S]（グアノシン5'-O- [3-チオトリポシン酸]）を刺激します。両方のサイトの親和性に対応するEC50値を持つ二相性的な方法での膜。結合研究では、高親和性部位をGPP [NH] P（5'-Guanylimidodiphosphate）の存在下では、低親和性部位に変換することはできません。[3H]ブラジキニンのモルモット回腸膜への特異的結合も、GPP [NH] pの濃度の増加により二相阻害されました。したがって、我々の結果は、モルモットの回腸膜に異なるシグナル伝達経路を持つ2つの別々のブラジキニンB2受容体の存在を支持します。1つは、おそらくGi2タイプとおそらくGi2タイプの毒素感受性Gタンパク質を介してアデニル酸シクラーゼを阻害するブラジキニンに対するピコモル親和性を持つ1つの受容体を備えています。ブラジキニンに対するナノモルの親和性を備えた他の受容体ホスホイノシチド加水分解のブラジキニン誘発刺激。

In guinea pig ileum membranes, the pre-stimulated adenylate cyclase activity was dose-dependently inhibited by picomolar concentrations of bradykinin exhibiting an apparent IC50 value of approximately 30 pM. At nanomolar bradykinin concentrations (> 1 nM) this effect was attenuated. The inhibition of ileal adenylate cyclase was completely prevented by both the bradykinin B2 receptor antagonist Hoe 140 (D-Arg[Hyp3,Thi5,D-Tic7,Oic8]bradykinin) and pertussis toxin. The potency of bradykinin to inhibit ileal adenylate cyclase considerably correlates with a binding site with picomolar affinity for bradykinin. In addition, a second site was constantly found displaying nanomolar binding affinity for bradykinin. The occurrence of two independent bradykinin B2 receptors in guinea pig ileum membranes is further supported by three other lines of evidence: bradykinin stimulates [35S]GTP[S] (guanosine 5'-O-[3-thiotriphosphate]) binding to guinea pig ileum membranes in a biphasic manner with EC50 values which correspond to the affinities of both sites. In binding studies, the high-affinity site cannot be transformed into the low-affinity site in the presence of Gpp[NH]p (5'-guanylylimidodiphosphate). The specific binding of [3H]bradykinin to guinea pig ileum membranes was also biphasically inhibited by increasing concentrations of Gpp[NH]p. Thus, our results favour the existence of two separate bradykinin B2 receptors with different signal transduction pathways in guinea pig ileum membranes: one receptor with picomolar affinity for bradykinin which inhibits adenylate cyclase via a pertussis toxin-sensitive G protein of probably the Gi2 type and the other receptor with nanomolar affinity for bradykinin which might be responsible for bradykinin-induced stimulation of phosphoinositide hydrolysis.