テロメアDNAの内部路ではなく、余分なテロメアは、サッカロミセステロメアでの転写抑制を減らします

酵母テロメアDNAは、テロソームとして知られる非ヌクレオソームクロマチン構造に組み立てられます。これは、その近くに配置された遺伝子の転写抑制に影響を与えると考えられています。これは、テロメア位置効果（TPE）と呼ばれる現象です。RAP1遺伝子の産物であるRap1pは、テロソームの成分です。TPEを示す細胞の割合は、RAP1デルタBBPと呼ばれるDNAに結合できないRAP1Pの大量の欠失誘導体を発現することにより、大幅に減少できることを示しています。3つの異なる株で観察されるTPEのこの減少は、それぞれが異なるテロメアでアッセイされた2つの異なる遺伝子について実証されました。対照的に、円形プラスミドにテロメアDNAの内部路を添加すると、TPEにほとんど影響がありませんでした。SIR3遺伝子の産物であるSir3pは、TPEの制限があるようです。SIR3Pの過剰発現は、RAP1 Delta BBPの発現で観察されたTPEの減少を完全に抑制しましたが、余分なテロメアを持つ細胞に高レベルのTPEを回復しませんでした。これらの結果は、余分なテロメアがTPEにとって重要なSIR3P以外の因子を滴定する必要があることを示唆しています。これらの結果は、テロメアDNAの非末端路よりもDNA末端の親和性が高い因子であり、この因子がTPEにとって重要であることを示している末端特異的結合因子の証拠を提供します。

Yeast telomeric DNA is assembled into a nonnucleosomal chromatin structure known as the telosome, which is thought to influence the transcriptional repression of genes placed in its vicinity, a phenomenon called telomere position effect (TPE). The product of the RAP1 gene, Rap1p, is a component of the telosome. We show that the fraction of cells exhibiting TPE can be substantially reduced by expressing large amounts of a deletion derivative of Rap1p that is unable to bind DNA, called Rap1 delta BBp, or by introducing extra telomeres on a linear plasmid, presumably because both compete in trans with telomeric chromatin for factor(s) important for TPE. This reduction in TPE, observed in three different strains, was demonstrated for two different genes, each assayed at a different telomere. In contrast, the addition of internal tracts of telomeric DNA on a circular plasmid had very little effect on TPE. The product of the SIR3 gene, Sir3p, appears to be limiting for TPE. Overexpression of Sir3p completely suppressed the reduction in TPE observed with expression of Rap1 delta BBp, but did not restore high levels of TPE to cells with extra telomeres. These results suggest that extra telomeres must titrate a factor other than Sir3p that is important for TPE. These results also provide evidence for a terminus-specific binding factor that is a factor with a higher affinity for DNA termini than for nonterminal tracts of telomeric DNA and indicate that this factor is important for TPE.