紫外線検出による高性能液体クロマトグラフィーによる血漿/血清中のクロザピンとノルロザピンの測定

高性能液体クロマトグラフィーによるヒト血漿または血清中のクロザピンとそのN-デスメチル代謝物を測定するための簡単な方法について説明します。内部標準（Nortriptyline、4 mg/L）（50ミクロール）およびTRISバッファー（2 mol/L、pH 10.6）（100ミクロール）を血漿/血清（200ミクロール）に加え、分析対象と内部標準をメチルテルトブチルエーテル（200ミクロール）に抽出します。抽出物は、1.5 mL/minの流量で溶離液として過塩素酸アンモニウム（35 mmol/L、pH 6.7）を含むメタノール（35 mmol/L、pH 6.7）を含むメタノールを使用して、スフェリソルブS5SCXを含む150 mmのカラムで分析されます。検出は、紫外線吸収（215 nm）によるものです。検出限界は、分析物の両方で0.05 mg/Lよりも優れており、クロザピンとノルクロザピンのアッセイ内精度（CV）は、それぞれ0.5 mg/Lで5.3および7.3％、1.5 mg/Lでそれぞれ2.6および2.8％でした。この方法は、急性過剰摂取後の血漿中のこれらの化合物の測定に適用できます。これは、治療に明らかに耐性のある患者のコンプライアンスの評価、およびクロザピンと他の神経弛緩薬および抗うつ薬との間の相互作用を特定するためです。

A simple method for the measurement of clozapine and its N-desmethyl metabolite in human plasma or serum by high performance liquid chromatography is described. An internal standard (aqueous nortriptyline, 4 mg/L) (50 microL) and Tris buffer (2 mol/L, pH 10.6) (100 microL) are added to plasma/serum (200 microL) and the analytes and internal standard extracted into methyl tert-butyl ether (200 microL). The extracts are analysed on a 150 mm column containing Spherisorb S5SCX using methanol containing ammonium perchlorate (35 mmol/L, pH 6.7) as eluent at a flow rate of 1.5 mL/min. Detection is by ultraviolet absorption (215 nm). The limit of detection is better than 0.05 mg/L for both analytes and the intra-assay precision (CV) for clozapine and norclozapine was 5.3 and 7.3% at 0.5 mg/L and 2.6 and 2.8% at 1.5 mg/L, respectively. The method can be applied to the measurement of these compounds in plasma after acute overdosage, for the assessment of compliance in patients apparently refractory to therapy and to identify interactions between clozapine and other neuroleptic and antidepressant drugs which may effect toxicity.