CDC27とCDC16を含む20S複合体は、ユビキチンのサイクリンBへの有糸分裂特異的共役を触媒します

サイクリンBは、ユビキチン依存性のタンパク質分解系により、後期の開始時に分解されます。このプロセスに必要なコンポーネントを特定するために、有糸分裂Xenopus卵抽出物を分けました。UBC4および少なくとも1つの他のユビキチン結合酵素がサイクリンのユビキチン化をサポートできることがわかります。サイクリンユビキチン化の有糸分裂特異性は、出芽酵母CDC16およびCDC27のホモログを含む20S複合体によって決定されます。これらのタンパク質は、酵母および哺乳類細胞の後期に必要であるため、この複合体をAnaphase促進複合体（APC）と呼びます。CDC27抗体はAPC活性を枯渇させますが、免疫積分化されたCDC27複合体は、組換えUBC4とユビキチン活性化酵素E1の混合物のいずれかを補完するのに十分です。これらの結果は、APCが有糸分裂の破壊のためにサイクリンBを標的とする調節されたユビキチンタンパク質リガーゼとして機能することを示唆しています。

Cyclin B is degraded at the onset of anaphase by a ubiquitin-dependent proteolytic system. We have fractionated mitotic Xenopus egg extracts to identify components required for this process. We find that UBC4 and at least one other ubiquitin-conjugating enzyme can support cyclin B ubiquitination. The mitotic specificity of cyclin ubiquitination is determined by a 20S complex that contains homologs of budding yeast CDC16 and CDC27. Because these proteins are required for anaphase in yeast and mammalian cells, we refer to this complex as the anaphase-promoting complex (APC). CDC27 antibodies deplete APC activity, while immunopurified CDC27 complexes are sufficient to complement either interphase extracts or a mixture of recombinant UBC4 and the ubiquitin-activating enzyme E1. These results suggest that APC functions as a regulated ubiquitin-protein ligase that targets cyclin B for destruction in mitosis.