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The Journal of biological chemistry1995Jun02Vol.270issue(22)

初期のエンドソーム関連タンパク質である EEA1 EEA1 は、システイン「フィンガー」に隣接する保存されたアルファヘリックス周辺膜タンパク質であり、カルモジュリン結合 IQ モチーフを含んでいます

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

初期のエンドソームは、エンドサイトーシット材料を受けた細胞区画であり、後期エンドソームおよびリソソームへの小胞輸送、または原形質膜へのリサイクルのためにそれらを並べ替えます。EEA1(初期エンドソーム抗原1)という名前の初期エンドソーム上の進化的に保存された180 kDaタンパク質をコードするヒトcDNAをクローニングしました。EEA1は、トランスフェリン受容体とRab5との免疫蛍光により共局在するため、初期エンドソームと関連していますが、Rab7とは関連していません。免疫電子顕微鏡検査は、内在化されたウシ血清アルブミンゴールドを含む尿細管性初期エンドソームに関連していることを示しています。EEA1は、サイトゾルおよび膜画分に存在する親水性末梢膜タンパク質です。Triton X-114の可溶化後の水相で分配され、膜から0.3 M NaCl抽出されます。これは、主にアルファヘリカルタンパク質であり、ミオシンと17-20%の配列同一性を共有し、カルモジュリン結合IQモチーフが含まれています。金属結合、システインの「指」モチーフが隣接しています。COOH末端指、CYS-X2-CYS-X12-CYS-X2-CYSおよびCYS-X2-CYS-X16-CYS-X2-CYSは、Saccharomyces cerevisiaee fab1タンパク質と著しく相同性のある領域内に存在します。エンドサイトーシスおよびCaenorhabditis elegans ZK632。これらの指はまた、液胞輸送に関係するS. cerevisiae VAC1、VPS11、およびVPS18Pタンパク質による限られた保存を示しています。EEA1は、初期のエンドソームを介したタンパク質の小胞輸送に必要であり、この活動にはその指モチーフが必要であることを提案します。

初期のエンドソームは、エンドサイトーシット材料を受けた細胞区画であり、後期エンドソームおよびリソソームへの小胞輸送、または原形質膜へのリサイクルのためにそれらを並べ替えます。EEA1(初期エンドソーム抗原1)という名前の初期エンドソーム上の進化的に保存された180 kDaタンパク質をコードするヒトcDNAをクローニングしました。EEA1は、トランスフェリン受容体とRab5との免疫蛍光により共局在するため、初期エンドソームと関連していますが、Rab7とは関連していません。免疫電子顕微鏡検査は、内在化されたウシ血清アルブミンゴールドを含む尿細管性初期エンドソームに関連していることを示しています。EEA1は、サイトゾルおよび膜画分に存在する親水性末梢膜タンパク質です。Triton X-114の可溶化後の水相で分配され、膜から0.3 M NaCl抽出されます。これは、主にアルファヘリカルタンパク質であり、ミオシンと17-20%の配列同一性を共有し、カルモジュリン結合IQモチーフが含まれています。金属結合、システインの「指」モチーフが隣接しています。COOH末端指、CYS-X2-CYS-X12-CYS-X2-CYSおよびCYS-X2-CYS-X16-CYS-X2-CYSは、Saccharomyces cerevisiaee fab1タンパク質と著しく相同性のある領域内に存在します。エンドサイトーシスおよびCaenorhabditis elegans ZK632。これらの指はまた、液胞輸送に関係するS. cerevisiae VAC1、VPS11、およびVPS18Pタンパク質による限られた保存を示しています。EEA1は、初期のエンドソームを介したタンパク質の小胞輸送に必要であり、この活動にはその指モチーフが必要であることを提案します。

Early endosomes are cellular compartments receiving endocytosed material and sorting them for vesicular transport to late endosomes and lysosomes or for recycling to the plasma membrane. We have cloned a human cDNA encoding an evolutionarily conserved 180-kDa protein on early endosomes named EEA1 (Early Endosome Antigen1). EEA1 is associated with early endosomes since it co-localizes by immunofluorescence with the transferrin receptor and with Rab5 but not with Rab7. Immunoelectron microscopy shows that it is associated with tubulovesicular early endosomes containing internalized bovine serum albumin-gold. EEA1 is a hydrophilic peripheral membrane protein present in cytosol and membrane fractions. It partitions in the aqueous phase after Triton X-114 solubilization and is extracted from membranes by 0.3 M NaCl. It is a predominantly alpha-helical protein sharing 17-20% sequence identity with the myosins and contains a calmodulin-binding IQ motif. It is flanked by metal-binding, cysteine "finger" motifs. The COOH-terminal fingers, Cys-X2-Cys-X12-Cys-X2-Cys and Cys-X2-Cys-X16-Cys-X2-Cys, are present within a region that is strikingly homologous with Saccharomyces cerevisiae FAB1 protein required for endocytosis and with Caenorhabditis elegans ZK632. These fingers also show limited conservation with S. cerevisiae VAC1, Vps11, and Vps18p proteins implicated in vacuolar transport. We propose that EEA1 is required for vesicular transport of proteins through early endosomes and that its finger motifs are required for this activity.

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