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生物活性ペプチド、ニューロテンシン(NT、13残基)およびニューロメディンN(NMN、6つの残基)、および147-レシジュエ犬前駆体の3つの領域に向かうために、生物活性ペプチド、ニューロテンシン(NT、13残基)およびニューロメディンN(NMN、6つの残基)に対する抗血清を使用して、前駆体由来ペプチドの抽出物の前駆体由来ペプチドを特定し、定量化するために使用しました。人間の骨細胞。ヒト膵臓カルチノイド腫瘍から得られたこの細胞ラインは、NT/NMN mRNAを構成的に発現させ、NTを分泌します。7つの前駆細胞由来ペプチドの定量により、bon細胞はNT/NMN前駆体処理の腸パターンを示すと結論付けました。これは、主にNMNの大きな分子(125アミノ酸)型の産生によって特徴付けられます。免疫化学分析とウエスタンブロッティングによって特定された4つの大きな分子成分は、ほとんどの場合、部分的に知られているヒトmRNA配列から予測された構造と一致する物理化学的特性を示しました。ただし、犬の腸内のこれらのペプチドについて前述のように、経験的に決定されたM(R)およびPI値は、おそらく追加の置換基の存在により、アミノ酸含有量だけから予測されるものよりもわずかに高かった。これらの結果は、Bon細胞が腸NT/NMN前駆体処理の調節と関与する酵素の性質を研究するための良好なin vitroモデルを提供する可能性があることを示唆しています。
生物活性ペプチド、ニューロテンシン(NT、13残基)およびニューロメディンN(NMN、6つの残基)、および147-レシジュエ犬前駆体の3つの領域に向かうために、生物活性ペプチド、ニューロテンシン(NT、13残基)およびニューロメディンN(NMN、6つの残基)に対する抗血清を使用して、前駆体由来ペプチドの抽出物の前駆体由来ペプチドを特定し、定量化するために使用しました。人間の骨細胞。ヒト膵臓カルチノイド腫瘍から得られたこの細胞ラインは、NT/NMN mRNAを構成的に発現させ、NTを分泌します。7つの前駆細胞由来ペプチドの定量により、bon細胞はNT/NMN前駆体処理の腸パターンを示すと結論付けました。これは、主にNMNの大きな分子(125アミノ酸)型の産生によって特徴付けられます。免疫化学分析とウエスタンブロッティングによって特定された4つの大きな分子成分は、ほとんどの場合、部分的に知られているヒトmRNA配列から予測された構造と一致する物理化学的特性を示しました。ただし、犬の腸内のこれらのペプチドについて前述のように、経験的に決定されたM(R)およびPI値は、おそらく追加の置換基の存在により、アミノ酸含有量だけから予測されるものよりもわずかに高かった。これらの結果は、Bon細胞が腸NT/NMN前駆体処理の調節と関与する酵素の性質を研究するための良好なin vitroモデルを提供する可能性があることを示唆しています。
Antisera towards the bioactive peptides, neurotensin (NT, 13 residues) and neuromedin N (NMN, 6 residues), as well as towards three regions of their 147-residue canine precursor were used to identify and to quantitate precursor-derived peptides in extracts of human BON cells. This cell-line, which was obtained from a human pancreatic carcinoid tumor, constitutively expresses NT/NMN mRNA and secretes NT. Quantitation of seven precursor-derived peptides led us to conclude that BON cells display the intestinal pattern of NT/NMN precursor processing, which is primarily characterized by the production of a large molecular (125 amino acid) form of NMN. Four large molecular components, identified by immunochemical analyses and Western blotting, displayed physico-chemical properties which, for the most part, were consistent with the structures predicted from the partially-known human mRNA sequence. However, as shown previously for these peptides in canine gut, the empirically determined M(r) and pI values were slightly higher than those predicted solely from the amino acid content, perhaps due to the presence of additional substituents. These results suggest that BON cells may provide a good in vitro model in which to study the regulation of intestinal NT/NMN precursor processing and the nature of the enzyme(s) involved.
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