ガンマインターフェロン誘発細胞死の潜在的なメディエーターとしての新規セリン/スレオニンキナーゼと新規15 kDタンパク質の同定

プログラムされた細胞死は、一部のサイトカインと細胞表面受容体との相互作用によって引き起こされることがよくあります。ここでは、Gamma Interferon（IFN-Gamma）がHeLa細胞で、プログラムされた細胞死の細胞学的特性を持つ細胞死の一種を誘導したと報告しています。このシステムでは、このタイプの細胞死の実行に不可欠な発現が不可欠である2つの新規遺伝子を特定しました。救助は、アンチセンスcDNA発現ライブラリーを使用したトランスフェクション後の細胞の陽性成長選択に基づいていました。2つの新規遺伝子のアンチセンスRNA媒介不活性化は、サイトカインの細胞質効果や壊死のタイプの細胞死からではなく、IFN-GAMMA誘発細胞死から細胞を保護しました。それらの遺伝子の1つ（DAP-1）は、基本的なプロリンが豊富な15 kDタンパク質をコードする単一の2.4 kb mRNAとして表されます。2番目は、単一の6.3 kb mRNAに転写され、8つのアンキリンリピートを運ぶユニークな160 kDカルモジュリン依存性セリン/スレオニンキナーゼ（DAPキナーゼ）のコードに転写されます。2つのDAPタンパク質の発現レベルは、対応するアンチセンスRNAによって選択的に減少しました。全体として、これら2つの新規遺伝子は、IFN-Gammaによって誘導されるプログラムされた細胞死の陽性メディエーターの候補であることが示唆されています。

Programmed cell death is often triggered by the interaction of some cytokines with their cell surface receptors. Here, we report that gamma interferon (IFN-gamma) induced in HeLa cells a type of cell death that had cytological characteristics of programmed cell death. In this system we have identified two novel genes whose expression was indispensable for the execution of this type of cell death. The rescue was based on positive growth selection of cells after transfection with antisense cDNA expression libraries. The antisense RNA-mediated inactivation of the two novel genes protected the cells from the IFN-gamma-induced cell death but not from the cytostatic effects of the cytokine or from a necrotic type of cell death. One of those genes (DAP-1) is expressed as a single 2.4-kb mRNA that codes for a basic, proline-rich, 15-kD protein. The second is transcribed into a single 6.3-kb mRNA and codes for a unique 160-kD calmodulin-dependent serine/threonine kinase (DAP kinase) that carries eight ankyrin repeats. The expression levels of the two DAP proteins were selectively reduced by the corresponding antisense RNAs. Altogether, it is suggested that these two novel genes are candidates for positive mediators of programmed cell death that is induced by IFN-gamma.