正常および腫瘍性のヒト組織におけるプロタンパク質変換（PC1/PC3およびPC2）：神経内分泌分化のマーカーとしての使用

免疫細胞化学と免疫ブロットティングにより、プロプロテインコンバーターゼ-2および-3（PC2およびPC3）の選択されたペプチド領域に対して上昇したポリクローナル抗体を使用した正常および腫瘍性のヒト組織を調べました。両方の酵素の免疫反応性は、下垂体、腸、膵臓、甲状腺、副腎の神経内分泌細胞、およびその腫瘍で検出されましたが、甲状腺卵胞細胞、副甲状腺、副腎皮質、精巣、および非ヌールエンドリアティスの両方の非ヌールエンドリアティス、副腎、および少数の非ヌウロイド性細胞では存在しませんでした。両方のPCは、神経内分泌系の実質的に普遍的な併用剤でしたが、神経表現型（例えば、フェオクロモサイトおよびメルケル細胞）を持つ細胞には主にPC2が含まれていましたが、古典的な内分泌細胞には主にPC3が含まれていました。PC3免疫反応性細胞は胃腸管に沿って存在していましたが、PC2は、十二指腸の空洞洞および近位3分の1でのみ高度に発現していました。二重免疫染色実験により、PC3とほぼすべての胃腸ペプチドとの共局在化が明らかになりましたが、PC2免疫反応性は、ほとんどガストリン、コレシストキニン、およびソマトスタチン細胞で発現しました。顕著に、PC3に対して免疫反応性のあるグルカゴン産生細胞の割合は腸内で高く、膵島や糖質が低かったのに対し、PC2では逆が発生しました。超微細構造レベルでは、免疫染色は、グラニンとペプチドホルモンの貯蔵部位である成熟した密なコア顆粒に限定されていました。副甲状腺細胞を除き、PC2および/またはPC3の発現は、分泌顆粒の標準マーカーであるグラニンの発生と相関していました。免疫ブロット実験により、免疫細胞化学的反応性の同一性が確認されました。PC2とPC3は、神経内分泌分化の非常に敏感なマーカーであり、異なる分布パターンを持っていると結論付けられており、これらの酵素に対する抗体は腫瘍の分析に重要な役割を果たす可能性があると結論付けられています。

By immunocytochemistry and immunoblotting, we examined normal and neoplastic human tissues with polyclonal antibodies raised against selected peptide regions of proprotein convertase-2 and -3 (PC2 and PC3), two proteases that have been shown to selectively cleave neuroendocrine precursor molecules at pairs of basic residues. Immunoreactivity for both enzymes was detected in neuroendocrine cells of pituitary, gut, pancreas, thyroid, and adrenals and in tumors thereof, but was absent in thyroid follicular cells, parathyroids, adrenal cortex, testes, and a number of nonneuroendocrine tissues, both normal and tumorous. Although both PCs were virtually universal concomitants of the neuroendocrine system, cells with a neural phenotype (e.g. pheochromocytes and Merkel cells) predominantly contained PC2, whereas classic endocrine cells contained mostly PC3. PC3 immunoreactive cells were abundant all along the gastrointestinal tract, whereas PC2 was highly expressed only in the pyloric antrum and proximal third of duodenum. Double immunostaining experiments revealed colocalization of PC3 with virtually all gastrointestinal peptides, whereas PC2 immunoreactivity was mostly expressed in gastrin, cholecystokinin, and somatostatin cells. Noticeably, the proportion of glucagon-producing cells immunoreactive for PC3 was high in the gut and low in pancreatic islets and glucagonomas, whereas the reverse occurred for PC2. At the ultrastructural level, immunostaining was confined to the mature dense core granules, the site of storage of granins and peptide hormones. With the exception of parathyroid cells, PC2 and/or PC3 expression correlated with the occurrence of granins, canonical markers of the secretory granules. Immunoblotting experiments confirmed the identity of the immunocytochemical reactivities. It is concluded that PC2 and PC3 are highly sensitive markers of neuroendocrine differentiation and have distinct distribution patterns, and that antibodies to these enzymes may play an important role in the analysis of tumors.