T細胞における低密度リポタンパク質受容体遺伝子発現の非ステロール調節

低密度リポタンパク質（LDL）受容体遺伝子発現の非ステロール調節は、マイトジェン応答性のヒトT細胞株で調べられました。ホルボールエステル12-ミリステート13-アセテート（PMA）およびイオノフォアイオノマイシンを伴う白血病T細胞株のジュラカットの刺激は、LDL受容体mRNAレベルを急速かつ一時的に増加させました。シクロヘキシミド（CHX）またはプロマイシンによるタンパク質合成の阻害は、マイトジェン刺激によるLDL受容体mRNAレベルの過剰誘導をもたらしました。LDL受容体mRNAレベルの増加は、mRNA半減期の安定化ではなく、遺伝子転写の増加に起因しました。したがって、レポーター遺伝子発現がLDL受容体プロモーターコンストラクトをトランスフェクトしたジュラカット細胞で評価された場合、同様の結果が得られ、mRNA半減期は刺激によって有意に変化しませんでした。LDL受容体遺伝子発現のステロールダウンレギュレーションにより、ジュルカット細胞におけるLDL受容体mRNAレベルのマイトジェン誘導も超誘導も防止されませんでした。タンパク質合成阻害剤CHXおよびアニソマイシンは、プロマイシンではなく、LDL受容体mRNAレベルを直接刺激し、これらの化合物がLDL受容体遺伝子転写に必要なシグナルを提供できることを示唆しています。まとめると、これらのデータは、プロテインキナーゼCの活性化、細胞内カルシウムの増加、タンパク質合成の阻害、およびタンパク質合成阻害剤CHXおよびアニソマイシンによって生成されるシグナルがLDL受容体遺伝子発現を誘発することを含む、さまざまな非テロール刺激がLDL受容体遺伝子発現を誘発することを示しています。したがって、LDL受容体遺伝子の転写は、周囲のステロールだけでなく、さまざまな一次反応または即時の初期遺伝子を支配するさまざまな影響によっても調節されます。これらの刺激は、LDL受容体遺伝子発現の正常な調節に重要な役割を果たす可能性があります。

Non-sterol regulation of low density lipoprotein (LDL) receptor gene expression was examined in a mitogen-responsive human T cell line. Stimulation of the leukemic T cell line Jurkat with the phorbol ester phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) and the calcium ionophore ionomycin rapidly and transiently increased LDL receptor mRNA levels. Inhibition of protein synthesis with cycloheximide (CHX) or puromycin resulted in superinduction of LDL receptor mRNA levels by mitogenic stimulation. The increase in LDL receptor mRNA levels resulted from increased gene transcription rather than stabilization of mRNA half-life. Thus, similar results were obtained when reporter gene expression was assessed in Jurkat cells transfected with LDL receptor promoter constructs and mRNA half-life was not significantly altered by the stimuli. Neither mitogenic induction nor superinduction of LDL receptor mRNA levels in Jurkat cells was prevented by sterol downregulation of LDL receptor gene expression. The protein synthesis inhibitors CHX and anisomycin, but not puromycin, also directly stimulated LDL receptor mRNA levels, suggesting that these compounds could provide a signal required for LDL receptor gene transcription. Taken together, these data indicate that various non-sterol stimuli, including activation of protein kinase C, increases in intracellular calcium, inhibition of protein synthesis, and signals generated by the protein synthesis inhibitors CHX and anisomycin, induce LDL receptor gene expression. Thus, transcription of the LDL receptor gene is not only regulated by ambient sterols but also by a variety of influences that govern the various primary response or immediate early genes. These stimuli may play an important role in normal regulation of LDL receptor gene expression.