アスパルルコサミニダーゼ遺伝子における点突然変異の特性評価：翻訳停止コドンの再スルーの証拠

プエルトリコの血統でリソソーム貯蔵疾患を引き起こすアスパルティルグルコサミニダーゼ（AGA）遺伝子の2番目のエクソンにおける新規のアスパルルコサミン尿（AGU）変異を特定しました。このT192-> A Transiversは、Cys64を早期翻訳停止コドンに置き換え、患者の線維芽細胞はAGA mRNAの定常状態レベルを劇的に減少させます。患者線維芽細胞からの免疫蛍光分析と免疫沈降した代謝標識AGAポリペプチドの分析は、40アミノ酸の予測短いポリペプチドの代わりに、通常サイズの不活性なAGA前駆体ポリペプチドの痕跡を予期せずに明らかにし、したがって、翻訳された翻訳の抑制による読み方を示しています。翻訳されたAGA前駆体はこれ以上処理されず、非アクティブなままです。Cys64置換は、明らかに小胞体中の新生のポリペプチドの折り畳みを乱し、タンパク質分解切断による活性化を防ぎます。

We have identified a novel aspartylglucosaminuria (AGU) mutation in the second exon of the aspartylglucosaminidase (AGA) gene resulting in a lysosomal storage disease in a Puerto Rican pedigree. This T192-->A transversion causes replacement of Cys64 with a premature translational stop codon and the patients' fibroblasts exhibit dramatically decreased steady-state levels of AGA mRNA. Immunofluorescence analysis and analysis of immunoprecipitated metabolically labelled AGA polypeptides from patient fibroblasts unexpectedly revealed traces of normally sized inactive AGA precursor polypeptide instead of the predicted short polypeptide of 40 amino acids, thus demonstrating readthrough due to suppression of the premature translational stop codon. The translated AGA precursor is not processed further and remains inactive. The Cys64 substitution evidently disturbs the folding of the nascent polypeptide in the endoplasmic reticulum, thus preventing activation by proteolytic cleavage.