エンドセリン受容体サブタイプBは、ラットメサンギアル細胞におけるエンドセリン-1の自己誘導を媒介します

エンドセリン-1（ET-1）の自己誘導は、ET-1の重大で長期にわたる効果に関与することが示唆されています。培養ラットの糸球体メサンギアル細胞におけるET-1の自動誘導の根底にあるメカニズムを調べました。メサンギウム細胞とET-1とのインキュベーションは、逆転写と組み合わせたポリメラーゼ連鎖反応によって評価されるように、PreproET-1 mRNA発現の即時かつ用量依存性刺激をもたらしました。ET-1（10（-7）m）への曝露から1時間以内に、PreproET-1 mRNA発現は、コントロール値の465 +/- 43％の最大レベル（P <0.01）に増加しました。免疫反応性ET-1ペプチドの産生の有意な刺激。核流出分析により、ET-1刺激の1および3時間でそれぞれ239および175％上の対照値を239および175％上回るPreproET-1 mRNAの転写速度の増加が明らかになりました。ET-1はまた、PreproET-1 mRNAの安定性を増加させ、非刺激細胞で見た20分から60分のmRNA半減期をもたらしました。ETB特異的拮抗薬RES701-1、10> 10（-9）mでの廃止されたET-1刺激（P <0.001）の廃止（P <0.001）の添加（P <0.001）、ETA特異的拮抗薬BQ123は効果がありませんでした（上昇していませんでした10（-5）m）。ETBアゴニストであるサラフォトキシンS6C（10（-7）m）は、PreproET-1 mRNA発現をコントロールを上回る201 +/- 14％（P <0.01）に大幅に刺激し、RES701-1によって大幅に減少した効果を著しく刺激しました（P <<0.05）。RES701-1は、ET-1ペプチドのET-1誘導産生を廃止しました（P <0.001）。まとめると、メサンギアル細胞では、ET-1の自動誘導が、PreproET-1転写とmRNA安定性の両方の増加を介してETB受容体サブタイプを介して発生することを示しています。

Autoinduction of endothelin-1 (ET-1) has been suggested to be involved in the profound and long-lasting effects of ET-1. We examined mechanisms that underlie autoinduction of ET-1 in cultured rat glomerular mesangial cells. Incubation of mesangial cells with ET-1 resulted in an immediate and dose-dependent stimulation of preproET-1 mRNA expression as assessed by polymerase chain reaction coupled with reverse transcription. Within 1 h of exposure to ET-1 (10(-7) M), preproET-1 mRNA expression was increased to a maximal level of 465 +/- 43% of the control value (p < 0.01), which was accompanied by significant stimulation of production of the immunoreactive ET-1 peptide. Nuclear run-off analysis revealed increases in the transcriptional rate of preproET-1 mRNA to 239 and 175% above the control values at 1 and 3 h of ET-1 stimulation, respectively. ET-1 also increased the stability of preproET-1 mRNA, resulting in an mRNA half-life of 60 min from 20 min seen in non-stimulated cells. Addition of an ETB-specific antagonist, RES701-1, at > 10(-9) M abolished ET-1 stimulation of preproET-1 mRNA (p < 0.001), whereas an ETA-specific antagonist, BQ123, was without effects (up to 10(-5) M). The ETB agonist, sarafotoxin S6c (10(-7) M), significantly stimulated preproET-1 mRNA expression to 201 +/- 14% above controls (p < 0.01), and effect that was lessened significantly by RES701-1 (p < 0.05). RES701-1 abolished the ET-1-induced production of the ET-1 peptide (p < 0.001). Taken together, we demonstrates that in mesangial cells, autoinduction of ET-1 occurs through the ETB receptor subtype via increases in both preproET-1 transcription and mRNA stability.