CD13（GP150;アミノペプチダーゼ-N）：血液中の主要な機能活性は血漿に局在しており、細胞表面に関連していません

この研究は、CD13/糖タンパク質150（GP150）/アミノペプチダーゼ-N活性の存在を細胞のない血漿に報告した最初の研究です。血漿中のアミノペプチダーゼ-Nは、流れる血液中のアミノペプチダーゼ-Nの主要な機能活性を定量的に提供すると判断しました。したがって、全血で観察されるアミノペプチダーゼ-N活性は部分的にはありますが、CD13モノクローナル抗体（mAb）WM15によってブロックされますが、そのような阻害の大きさは低く（<25％）（<25％）（<25％）、洗浄された細胞断面を使用して選択した洗浄細胞断面を使用して中球（30.6％阻害）またはモノカイトを使用して観察されたものと同様です（21.8.8.8.8.8.8.8.8.8.8.8.8.8.細胞成分を含まない血漿は、WM15によって大部分が抑制される（> 70％）かなりのアミノペプチダーゼ-N活性を持っています。ヘパリンまたはクエン酸塩に収集された血液は同様のデータを生成しますが、EDTAに採取された血液は、この分子の適切な機能に必要な既知の重金属イオン関連の阻害と一致して、CD13/アミノペプチダーゼ-N活性の減少を引き起こします。単球および顆粒球濃縮細胞画分は、CD13抗体によって有意に阻害されるアミノペプチダーゼ-N活性を有していますが、リンパ球濃縮細胞画分はアミノペプチダーゼ-N様活性も持っています。ただし、後者の場合、この活性はCD13抗体によって抑制されません。血漿アミノペプチダーゼ-Nの免疫親和性分離も実施されています。機能的研究とドデシル硫酸ナトリウム - ポリアクリルアミドゲル（SDS-PAGE）電気泳動を使用したさらなる特性評価は、CD13 MABがアミノペプチダーゼ-N活性の血漿を完全に除去できること、および精製されたタンパク質が細胞由来の材料と同様の電気泳動特性を持っていることを示しています。したがって、これらのデータは、血漿および細胞関連のアミノペプチダーゼ-N様タンパク質の可溶性（つまり、非セル関連）型のCD13/GP150以外の細胞関連のアミノペプチダーゼ-N様タンパク質の両方の血液内の存在の証拠を提供します。これらの発見は、血液中のこの分子の多くの機能を理解するために重要な意味を持っています。

This study is the first to report the presence of CD13/glycoprotein 150 (GP150)/aminopeptidase-N activity in cell-free plasma. We have determined that aminopeptidase-N in plasma provides, quantitatively, aminopeptidase-N's predominant functional activity within flowing blood. Thus, while aminopeptidase-N activity observed in whole blood can be partly, but significantly, blocked by the CD13 monoclonal antibody (MAB) WM15, the magnitude of such inhibition is low (< 25%) and similar to that observed using washed cell fractions selectively enriched for neutrophils (30.6% inhibition) or monocytes (21.8% inhibition). Plasma, free of cell components, possesses substantial aminopeptidase-N activity that is largely inhibitable (> 70%) by WM15. Blood collected into heparin or citrate yields similar data, while blood collected into EDTA gives rise to reduced CD13/aminopeptidase-N activity, consistent with inhibition of the known heavy-metal ion association necessary for proper functioning of this molecule. Although monocyte- and granulocyte-enriched cell fractions possess aminopeptidase-N activity significantly inhibitable by CD13 antibodies, lymphocyte-enriched cell fractions also possess aminopeptidase-N-like activity; however, in the latter case, this activity is not inhibitable by CD13 antibodies. Immunoaffinity isolation of plasma aminopeptidase-N has also been carried out; further characterization using functional studies and sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel (SDS-PAGE) electrophoresis indicates that CD13 MABs can completely clear plasma of aminopeptidase-N activity and that the purified protein has similar electrophoretic characteristics to cell-derived material. These data, therefore, provide evidence for the presence within blood both of a soluble (that is, non-cell-associated) form of CD13/GP150/aminopeptidase-N localizable to plasma and of cell-associated, aminopeptidase-N-like proteins other than CD13/GP150. These findings have significant implications for our understanding of the many functions of this molecule in blood.