PAP調節DNAコントロールのメチル化パターンPyelonephritis関連PILI相のe coliの変動

大腸菌におけるパイエロー腎炎関連ピリ（PAP）発現状態をオンとオフの相とオフの間のスイッチの調節におけるPAP DNAメチル化パターンの役割を調べました。2つのDAMメチルトランスフェラーゼ部位、GATC1028とGATC1130は、以前に相対オフ細胞に対して位相上で示差的にメチル化されることが示されました。ここに提示された研究では、これらの部位は変異してメチル化できないようにし、これらの変異がパップ相変動に及ぼす影響を調べました。我々の結果は、LRPおよびPAPI調節タンパク質の結合をこの部位に阻害することにより、GATC1028のメチル化がオン状態の形成をブロックすることを示しています。逆に、GATC1130のメチル化は、オン状態に必要です。証拠は、これがピリンプロモーターと重複する部位へのLRPの結合の阻害によって発生することを示しています。メチル化状態のオンとオフの位相間の遷移がどのように発生するかを説明するモデルが提示されます。

We have examined the roles of pap DNA methylation patterns in the regulation of the switch between phase ON and OFF pyelonephritis-associated pili (Pap) expression states in E. coli. Two Dam methyltransferase sites, GATC1028 and GATC1130, were shown previously to be differentially methylated in phase ON versus phase OFF cells. In work presented here, these sites were mutated so that they could not be methylated, and the effects of these mutations on Pap phase variation were examined. Our results show that methylation of GATC1028 blocks formation of the ON state by inhibiting the binding of Lrp and PapI regulatory proteins to this site. Conversely, methylation of GATC1130 is required for the ON state. Evidence indicates that this occurs by the inhibition of binding of Lrp to sites overlapping the pilin promoter. A model describing how the transition between the phase ON and OFF methylation states might occur is presented.