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Journal of forensic sciences1994May01Vol.39issue(3)

検証研究臭化エチジウムのないLEアガロースゲルの制限断片長多型(RFLP)の法医学分析に関する検証:汚染物質、日光、およびさまざまな量のデオキシリボヌクレ酸(DNA)の電気泳動の影響(DNA)

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PMID:7911823DOI:
文献タイプ:
  • Journal Article
概要
Abstract

この研究は、日光、さまざまな汚染物質(通常は法医学サンプルで見られるもの)、および血液および精液ゼンから分離されたDNAから生成された制限フラグメント長多型(RFLP)パターンに対するさまざまな量のDNAの電気泳動を分析するように設計されました。DNA RFLPパターンは、HAE III制限酵素消化、低エレクトロエンド吸虫(LE)アガロースゲル電気泳動(エチジウム臭化エチジウム移動)、南部移動、DNAプローブとのハイブリダイゼーション、高度な多形数のタンデム反復(VNTRS)および自己放射線学のハイブリダイゼーション後に得られました。。コンピューター支援画像分析を使用して、コントロールサンプルに関連してRFLPバンドサイズのバリエーションを検出しました。サンプル間の比較は、高分子量DNAの存在、完全な制限消化を達成する能力、および得られたRFLPフラグメントサイズのために行われました。結果は、血液および精液の染色が環境および汚染因子にさらされると、高分子量DNAが得られることを示しています。RFLP対立遺伝子のサイズは、環境条件、汚染因子、またはさまざまな量のDNAの負荷によって大きな影響を受けませんでした。この研究は、法医学用途向けのDNAタイピングの信頼性と妥当性をさらに文書化するのに役立ちます。

この研究は、日光、さまざまな汚染物質(通常は法医学サンプルで見られるもの)、および血液および精液ゼンから分離されたDNAから生成された制限フラグメント長多型(RFLP)パターンに対するさまざまな量のDNAの電気泳動を分析するように設計されました。DNA RFLPパターンは、HAE III制限酵素消化、低エレクトロエンド吸虫(LE)アガロースゲル電気泳動(エチジウム臭化エチジウム移動)、南部移動、DNAプローブとのハイブリダイゼーション、高度な多形数のタンデム反復(VNTRS)および自己放射線学のハイブリダイゼーション後に得られました。。コンピューター支援画像分析を使用して、コントロールサンプルに関連してRFLPバンドサイズのバリエーションを検出しました。サンプル間の比較は、高分子量DNAの存在、完全な制限消化を達成する能力、および得られたRFLPフラグメントサイズのために行われました。結果は、血液および精液の染色が環境および汚染因子にさらされると、高分子量DNAが得られることを示しています。RFLP対立遺伝子のサイズは、環境条件、汚染因子、またはさまざまな量のDNAの負荷によって大きな影響を受けませんでした。この研究は、法医学用途向けのDNAタイピングの信頼性と妥当性をさらに文書化するのに役立ちます。

This study was designed to analyze the effects of sunlight, various contaminants (those found typically in forensic samples) and the electrophoresis of varying quantities of DNA on the restriction fragment length polymorphism (RFLP) patterns produced from DNA isolated from blood and semen stains. The DNA RFLP patterns were obtained following Hae III restriction enzyme digestion, low electroendosmotic (LE) agarose gel electrophoresis (in the absence of ethidium bromide), Southern transfer, hybridization with DNA probes detecting highly polymorphic variable number of tandem repeats (VNTRs) and autoradiography. Computer assisted image analyses were used to detect variations in RFLP band sizes in relation to control samples. Comparisons between the samples were made for the presence of high molecular weight DNA, the ability to achieve a complete restriction digestion, and the RFLP fragment sizes obtained. The results demonstrate that high molecular weight DNA can be obtained when blood and semen stains are subjected to environmental and contaminating factors. The RFLP allele sizes were not significantly affected by environmental conditions, contamination factors or by loading varying amounts of DNA. This study serves to further document the reliability and validity of DNA typing for forensic applications.

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