ブルセラリボソームタンパク質L7/L12は、ブルセラ感染したモルモットの遅延型過敏症のためのブルセリンインラの抗原性の主要な成分です。

ヒトと動物のブルセラ症の過程での遅延型過敏症（DTH）反応は、ブルセリン・インラ（ブルセレルゲン）皮膚検査によって明らかになる可能性があります。ブルセレルゲンは、異なる分子量の20を超えるタンパク質で構成されています。Brucella melitensis Rev1感化されたモルモットでDTHを誘発する12 kDaタンパク質は、ブルセレルゲンのアレルギー性特性の重要な成分であることがわかりました。このタンパク質をコードする遺伝子の配列決定により、それはL7/L12リボソームタンパク質として識別されました。B. melitensisのL7/L12遺伝子は、PCRによって増幅され、大腸菌PQE30プラスミドでサブクローニングされました。得られた組換えタンパク質は、感作した動物でDTH反応を生成しませんでした。ウサギで特定の抗体を上げるために使用されました。これらの抗体を伴うアフィニティクロマトグラフィーを使用して、B。melitensisRev1で感作されたモルモットでDTH反応を生成するB. melitensis細胞ゾル調製物から単一のタンパク質を分離しました。タンパク質のN末端アミノ酸配列決定により、それがL7/L12リボソームタンパク質であることが確認されました。これは、細胞内で増殖する細菌に感染した動物のDTH応答における定義された細菌リボソームタンパク質の関与に関する最初の完全な報告です。

A delayed-type hypersensitivity (DTH) reaction in the course of brucellosis in humans and animals can be revealed by the brucellin INRA (Brucellergen) skin test. Brucellergen is composed of more than 20 proteins of different molecular weights. A 12-kDa protein eliciting DTH in Brucella melitensis Rev1-sensitized guinea pigs was found to be a significant component for the allergenic properties of Brucellergen. Sequencing of the gene encoding this protein identified it as the L7/L12 ribosomal protein. The L7/L12 gene of B. melitensis was amplified by PCR and subcloned in the Escherichia coli pQE30 plasmid. The resulting recombinant protein did not produce a DTH reaction in sensitized animals. It was used to raise specific antibodies in a rabbit. Affinity chromatography with these antibodies was used to isolate a single protein from Brucellergen and from B. melitensis cytosol preparations which produced a DTH reaction in guinea pigs sensitized with B. melitensis Rev1. N-terminal amino acid sequencing of the protein confirmed that it was the L7/L12 ribosomal protein. This is the first complete report on the involvement of a defined bacterial ribosomal protein in the DTH response of animals infected with intracellularly multiplying bacteria.