胎児腎臓およびウィルムス腫瘍におけるWT1タンパク質の発現

背景：ウィルムスの腫瘍は、メタン球芽細胞の発達における摂動に起因すると考えられている胚性腎臓の新生物です。候補遺伝子（WT1）がクローン化されており、多くのWilmsの腫瘍で変異していることがわかっており、腫瘍抑制遺伝子としての推奨される役割と一致しています。この遺伝子は、胚腎の正常な発達に不可欠であることが示されています。 実験設計：本研究の目的は、WT1遺伝子が調節されるレベルに関する情報を提供することでした。免疫組織化学、免疫蛍光、およびin situハイブリダイゼーションを使用して、それぞれWT1タンパク質とmRNAの局在を調べました。さらに、免疫蛍光を使用して、7つのウィルムの腫瘍のWT1発現を調べました。 結果：胎児腎臓では、WT1転写産物が誘導された爆風細胞、腎小胞、コンマ型体およびS字型体の前麻痺性細胞、およびYLOMERILIのポドサイトのハイブリダイゼーションシグナルの増加で検出されました。組換えWT1融合タンパク質に対する抗体によって検出されたWT1タンパク質は、上記の同じ細胞型の核で見られ、染色強度はWT1転写産物のレベルに匹敵しました。7つのWilMS腫瘍の免疫染色により、WT1タンパク質は、通常の対応物もWT1タンパク質を発現した腫瘍構造でのみ発現することが示されました。間質細胞も横紋筋芽細胞もWT1タンパク質を含んでいませんでした。 結論：結果は、胎児の腎臓では、WT1転写産物とタンパク質が協調的に発現し、メタネフリック芽球細胞の上皮細胞への分化と強く関連していることを示しています。さらに、WT1転写産物とタンパク質が協調的に発現されるという発見は、WT1遺伝子発現が主に転写のレベルで調節されていることを示唆しています。

BACKGROUND: Wilms' tumors are embryonic kidney neoplasms believed to result from a perturbation in the development of the metanephric blastema. A candidate gene (WT1) has been cloned that has been found to be mutated in a number of Wilms' tumors, consistent with its suggested role as a tumor suppressor gene. This gene has been shown to be essential to the normal development of the embryonic kidney. EXPERIMENTAL DESIGN: The aim of the present study was to provide information on the level at which the WT1 gene is regulated. Immunohistochemistry, immunofluorescence, and in situ hybridization was used to examine the localization of WT1 protein and mRNA, respectively. We further used immunofluorescence to examine the WT1 expression in seven Wilms' tumors. RESULTS: In fetal kidneys, WT1 transcripts were detected with increasing levels of hybridization signal in induced blastemal cells, renal vesicles, pre-podocytes of comma- and S-shaped bodies, and podocytes of glomeruli. WT1 protein, detected by an antibody raised against recombinant WT1 fusion protein, was seen in the nuclei of the same cell types mentioned above, and the staining intensity was comparable to the levels of WT1 transcripts. Immunostaining of seven Wilms tumors demonstrated that WT1 protein was expressed only in neoplastic structures whose normal counterparts also expressed WT1 protein. Neither stromal cells nor rhabdomyoblasts contained WT1 protein. CONCLUSIONS: The results show that in fetal kidney, WT1 transcripts and protein are coordinately expressed, and strongly associated with differentiation of metanephric blastemal cells into epithelial cells. Furthermore, the finding that WT1 transcripts and protein are coordinately expressed, suggests that WT1 gene expression is primarily regulated at the level of transcription.