マウスPGK-1プロモーターは、トランスジェニックマウスでは広範囲にわたる均一な発現ではありません

PGK-1は、解糖にすべての細胞に必要な酵素である3-ホスホグリセリ酸キナーゼをコードするX連鎖遺伝子です。PGK-1遺伝子の調節配列を使用して、大腸菌で作られた大腸菌LACZレポーター遺伝子と2株のトランスジェニック動物を駆動しました。PGK-1の発現レベルは、成体組織から別の組織に変化し、導入遺伝子も同様に調節されました。しかし、導入遺伝子によってコードされたベータガラクトシダーゼのin situ染色は、その発現レベルにおける広範な細胞間変動性を示しました。導入遺伝子産物のために、細胞の再現可能なサブセットが暗く染色されました。これらのベータガラクトシダーゼ陽性細胞のいくつかは急速に増殖していましたが、他のベータガラクトシダーゼ陽性細胞は代謝的に非常に活性であると思われ、PGK-1プロモーターが高レベルの解糖を必要とする細胞でより活性であるように調節されていることを示唆しています。PGK-1はX連鎖であり、X染色体の不活性化の影響を受けますが、トランス遺伝子は女性の体細胞または雄の生殖細胞のいずれでも不活性化されませんでした。したがって、PGK-1プロモーターはすべての組織で導入遺伝子発現を駆動しますが、発現レベルは各細胞で均一ではありません。

Pgk-1 is an X-linked gene encoding 3-phosphoglycerate kinase, an enzyme necessary in every cell for glycolysis. The regulatory sequences of the Pgk-1 gene were used to drive the E. coli lacZ reporter gene and 2 strains of transgenic animals created with this Pgk-lacZ transgene carried on autosomes. The levels of expression of Pgk-1 varied from one adult tissue to another and the transgene was similarly regulated. However, in situ staining of the beta-galactosidase encoded by the transgene indicated extensive cell-to-cell variability in its level of expression. A reproducible subset of cells stained darkly for the transgene product. Some of these beta-galactosidase positive cells were rapidly proliferating while others appeared to be metabolically very active, suggesting that the Pgk-1 promoter is regulated so as to be more active in cells requiring high levels of glycolysis. Although Pgk-1 is X-linked and subject to X chromosome inactivation, the transgenes were not inactivated in either female somatic or male germ cells. Thus, the Pgk-1 promoter drives transgene expression in all tissues but the levels of expression are not uniform in each cell.