Schizosaccharomyces PombeのLEU1-32およびURA4-294での効率的な標的統合

分裂酵母Schizosaccharomyces Pombeとの相同統合は、あまり特徴付けられていません。この研究では、LEU1+およびURA4+遺伝子を染色体局所に運ぶプラスミドの統合を調べました。ゲノムDNAブロット分析により、形質転換体の大部分は、Leu1+またはUra4+への遺伝子変換のはるかに少ない割合で、相同組換えを介して統合されたプラスミドベクターの1つ以上のコピーを持っていることが示されました。どちらの遺伝子でも、非相対的な組換えイベントは観察されませんでした。S. PombeのLEU1-32およびURA4-294遺伝子座での標的統合のための一般的に有用なLEU1+およびURA4+プラスミドの構築について説明します。

Homologous integration into the fission yeast Schizosaccharomyces pombe has not been well characterized. In this study, we have examined integration of plasmids carrying the leu1+ and ura4+ genes into their chromosomal loci. Genomic DNA blot analysis demonstrated that the majority of transformants have one or more copies of the plasmid vector integrated via homologous recombination with a much smaller fraction of gene conversion to leu1+ or ura4+. Non-homologous recombination events were not observed for either gene. We describe the construction of generally useful leu1+ and ura4+ plasmids for targeted integration at the leu1-32 and ura4-294 loci of S. pombe.