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旗エピトープは、融合タンパク質の免疫親和性精製に役立つ8つのアミノ酸ペプチド（Asptyllysaspaspaspasplys）です。カルシウム依存的に旗のエピトープを結合し、N末端フラグシーケンスを必要とするモノクローナル抗体（抗Flag M1）が以前に説明されています。N末端Met-FlagおよびC末端アルカリホスファターゼへのC末端旗融合の免疫親和性精製における2番目の抗Flagモノクローナル抗体（抗Flag M2）の使用について説明します。抗FLAG M2モノクローナル抗体の旗エピトープへの結合はカルシウム依存性ではありませんが、境界融合タンパク質は、旗ペプチドとの競合によって溶出することができます。
旗エピトープは、融合タンパク質の免疫親和性精製に役立つ8つのアミノ酸ペプチド（Asptyllysaspaspaspasplys）です。カルシウム依存的に旗のエピトープを結合し、N末端フラグシーケンスを必要とするモノクローナル抗体（抗Flag M1）が以前に説明されています。N末端Met-FlagおよびC末端アルカリホスファターゼへのC末端旗融合の免疫親和性精製における2番目の抗Flagモノクローナル抗体（抗Flag M2）の使用について説明します。抗FLAG M2モノクローナル抗体の旗エピトープへの結合はカルシウム依存性ではありませんが、境界融合タンパク質は、旗ペプチドとの競合によって溶出することができます。
The FLAG epitope is an eight amino acid peptide (AspTyrLysAspAspAspAspLys) that is useful for immunoaffinity purification of fusion proteins. A monoclonal antibody (anti-FLAG M1) that binds the FLAG epitope in a calcium-dependent manner and requires an N-terminal FLAG sequence has been described previously. We describe the use of a second anti-FLAG monoclonal antibody (anti-FLAG M2) in immunoaffinity purification of N-terminal Met-FLAG and C-terminal FLAG fusion to bacterial alkaline phosphatase. Although binding of an anti-FLAG M2 monoclonal antibody to the FLAG epitope is not calcium-dependent, bound fusion proteins can be eluted by competition with FLAG peptide.
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