著名医師による解説が無料で読めます
すると翻訳の精度が向上します
カリオリピンおよびプロテアーゼ活性化プロテインキナーゼ（PAK）は、ラット肝臓の細胞質抽出物から分離されています。酵素（PAK-1）は、リボソームタンパク質S6-（229-239）ペプチド類似体をリン酸化し、限られたタンパク質分解によって活性化できます。精製された116-kDa PAK-1ホロ酵素とその活性触媒断片の両方に由来するトリプティックペプチドの部分的なアミノ酸配列は、触媒ドメインがプロテインキナーゼCファミリーに最も関連している（50-58％同一性）ことを明らかにしています。PAK-1は、既知のプロテインキナーゼCアイソフォームのものとは異なるタンパク質およびペプチド基質の特異性を有しており、プロテインキナーゼC-α-（19-31）擬似堆積ペプチドによる阻害に鈍感です。ホスファチジルセリン、ジアシルグリセロール、およびホルボールエステルは、S6ペプチド基質に向かってPAK-1を活性化しません。しかし、最も効果的なカーディオリピンである他の酸性リン脂質は、PAK-1をトリプシンと同様に活性化します。Cardiolipinまたは限られたタンパク質分解による活性化によって生成されたPAK-1触媒活性は、速度論的に類似しており、S6-（229-239）ペプチド基質についてはそれぞれ3.6および3.4マイクロームのkm値がありました。しかし、基質としてのプロタミン硫酸およびグリコーゲン合成酵素 - （1-12）ペプチド類似体との触媒活性で違いが観察されました。PAK-1は、プロテインキナーゼCスーパーファミリーの既知のメンバーのものとは異なる一次構造、基質特異性、およびin vitroでの調節のメカニズムを備えたリン脂質調節プロテインキナーゼであると結論付けられました。
カリオリピンおよびプロテアーゼ活性化プロテインキナーゼ（PAK）は、ラット肝臓の細胞質抽出物から分離されています。酵素（PAK-1）は、リボソームタンパク質S6-（229-239）ペプチド類似体をリン酸化し、限られたタンパク質分解によって活性化できます。精製された116-kDa PAK-1ホロ酵素とその活性触媒断片の両方に由来するトリプティックペプチドの部分的なアミノ酸配列は、触媒ドメインがプロテインキナーゼCファミリーに最も関連している（50-58％同一性）ことを明らかにしています。PAK-1は、既知のプロテインキナーゼCアイソフォームのものとは異なるタンパク質およびペプチド基質の特異性を有しており、プロテインキナーゼC-α-（19-31）擬似堆積ペプチドによる阻害に鈍感です。ホスファチジルセリン、ジアシルグリセロール、およびホルボールエステルは、S6ペプチド基質に向かってPAK-1を活性化しません。しかし、最も効果的なカーディオリピンである他の酸性リン脂質は、PAK-1をトリプシンと同様に活性化します。Cardiolipinまたは限られたタンパク質分解による活性化によって生成されたPAK-1触媒活性は、速度論的に類似しており、S6-（229-239）ペプチド基質についてはそれぞれ3.6および3.4マイクロームのkm値がありました。しかし、基質としてのプロタミン硫酸およびグリコーゲン合成酵素 - （1-12）ペプチド類似体との触媒活性で違いが観察されました。PAK-1は、プロテインキナーゼCスーパーファミリーの既知のメンバーのものとは異なる一次構造、基質特異性、およびin vitroでの調節のメカニズムを備えたリン脂質調節プロテインキナーゼであると結論付けられました。
A cardiolipin- and protease-activated protein kinase (PAK) has been isolated from cytoplasmic extracts of rat liver. The enzyme (PAK-1) phosphorylates the ribosomal protein S6-(229-239) peptide analogue and can be activated by limited proteolysis. Partial amino acid sequences of tryptic peptides derived from both the purified 116-kDa PAK-1 holoenzyme and its active catalytic fragment reveal that the catalytic domain is most related (50-58% identity) to the protein kinase C family. PAK-1 has protein and peptide substrate specificities distinct from those of known protein kinase C isoforms and is insensitive to inhibition by the protein kinase C-alpha-(19-31) pseudosubstrate peptide. Phosphatidylserine, diacylglycerol, and phorbol ester do not activate PAK-1 toward the S6 peptide substrate. However, other acidic phospholipids, the most effective being cardiolipin, activate PAK-1 to a similar extent as trypsin. The PAK-1 catalytic activities generated through activation by cardiolipin or limited proteolysis were kinetically similar, with Km values of 3.6 and 3.4 microM, respectively, for the S6-(229-239) peptide substrate. However, differences were observed in the catalytic activities with protamine sulfate and the glycogen synthase-(1-12) peptide analogue as substrates. It was concluded that PAK-1 is a phospholipid-regulated protein kinase with a primary structure, substrate specificity, and mechanism of regulation in vitro distinct from those of any known member of the protein kinase C superfamily.
医師のための臨床サポートサービス
ヒポクラ x マイナビのご紹介
無料会員登録していただくと、さらに便利で効率的な検索が可能になります。