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International journal for parasitology1994May01Vol.24issue(3)

酵素結合免疫吸着アッセイ(ELISA)およびウエスタンブロットによる馬のバベシアカバリ感染症の診断

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PMID:8070952DOI:
文献タイプ:
  • Comparative Study
  • Journal Article
概要
Abstract

in vitro培養バベシア・カバリから、100%感染した赤血球の調製が得られました。このことから、B。カバリ抗原は洗剤3- [(3-コラミドプロピル) - ジメチルアンモニオ] -1-プロパン - スルホネート(CHAPS)で抽出され、ELISA抗原として使用されました。同じドナー馬からの正常赤血球の対照抗原が同一の方法で調製されました。ELISAとウエスタンブロットは、B。CaballiまたはB. Equiに実験的に感染した馬からの血清のテストによって検証されました。ELISAおよびウエスタンブロットの結果は、免疫蛍光抗体検査(IFAT)および補体固定試験(CFT)によって得られた結果と比較されました。感染後の14日目から血清に対して得られた98.3%のELISAの感度は、ウエスタンブロット(94.9%)、IFAT(96.6%)、CFT(28.8%)よりも優れていました。ELISAおよびウエスタンブロットでは、Babesia sppに感染していない馬からの106血清を含む肯定的な結果は得られませんでした。両方のテストで計算された特異性が100%になります。B.等陽性血清の交差反応は、IFAT(4%)よりもELISA(20%)で大部分が発生しました。ウエスタンブロットとCFTでは、交差反応は観察されませんでした。ELISAのより高い感度は、132のフィールド血清のテストによっても実証されました。IFAT(92)またはCFT(41)と比較して、ELISA(112)によってより肯定的な結果が得られました。これらの結果の妥当性は、ウエスタンブロットによる血清のテストによって確認されました。最も敏感なテストとしてのELISAは、非流行領域への導入を防ぐために、キャリア馬を識別するための最良の方法を提供します(輸出テスト)。

in vitro培養バベシア・カバリから、100%感染した赤血球の調製が得られました。このことから、B。カバリ抗原は洗剤3- [(3-コラミドプロピル) - ジメチルアンモニオ] -1-プロパン - スルホネート(CHAPS)で抽出され、ELISA抗原として使用されました。同じドナー馬からの正常赤血球の対照抗原が同一の方法で調製されました。ELISAとウエスタンブロットは、B。CaballiまたはB. Equiに実験的に感染した馬からの血清のテストによって検証されました。ELISAおよびウエスタンブロットの結果は、免疫蛍光抗体検査(IFAT)および補体固定試験(CFT)によって得られた結果と比較されました。感染後の14日目から血清に対して得られた98.3%のELISAの感度は、ウエスタンブロット(94.9%)、IFAT(96.6%)、CFT(28.8%)よりも優れていました。ELISAおよびウエスタンブロットでは、Babesia sppに感染していない馬からの106血清を含む肯定的な結果は得られませんでした。両方のテストで計算された特異性が100%になります。B.等陽性血清の交差反応は、IFAT(4%)よりもELISA(20%)で大部分が発生しました。ウエスタンブロットとCFTでは、交差反応は観察されませんでした。ELISAのより高い感度は、132のフィールド血清のテストによっても実証されました。IFAT(92)またはCFT(41)と比較して、ELISA(112)によってより肯定的な結果が得られました。これらの結果の妥当性は、ウエスタンブロットによる血清のテストによって確認されました。最も敏感なテストとしてのELISAは、非流行領域への導入を防ぐために、キャリア馬を識別するための最良の方法を提供します(輸出テスト)。

From Babesia caballi in vitro cultures a preparation of 100% infected erythrocytes was obtained. From this, B. caballi antigens were extracted with the detergent 3-[(3-Cholamidopropyl)-dimethylammonio]-1-propane-sulfonate (CHAPS) and used as ELISA antigens. A control antigen of normal erythrocytes from the same donor horse was prepared in an identical manner. The ELISA and Western blot were validated by testing of sera from horses experimentally infected with B. caballi or B. equi or not infected with Babesia spp. ELISA and Western blot results were compared with those obtained by the immunofluorescence antibody test (IFAT) and complement fixation test (CFT). The sensitivity of the ELISA of 98.3% obtained for sera from day 14 after infection was superior to the Western blot (94.9%), the IFAT (96.6%) and the CFT (28.8%). No positive results were obtained in the ELISA and Western blot with 106 sera from horses not infected with Babesia spp. resulting in a calculated specificity of 100% for both tests. Cross reactions of B. equi-positive sera did occur to a larger extent in the ELISA (20%) than in the IFAT (4%). No cross reactions were observed with the Western blot and the CFT. The higher sensitivity of the ELISA was also demonstrated by testing of 132 field sera: more positive results were obtained by ELISA (112) as compared to IFAT (92) or CFT (41). The validity of these results was confirmed by testing of sera by Western blot. The ELISA as the most sensitive test provides the best method for the identification of carrier horses to prevent the introduction into non-endemic areas (export testing).(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)

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