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Journal of bacteriology1975Oct01Vol.124issue(1)

Streptococcus faecalisのプロトプラストによって合成される可溶性ペプチドグリカンフラグメントにおける推定ペプチド架橋の特性評価

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, U.S. Gov't, P.H.S.
概要
Abstract

Streptococcus faecalis ATCC 9790のプロトプラストは、リゾチームの助けを借りて生成され、これらの体が可溶性のペプチド架橋ペプチドグリカン(PG)フラグメントを合成する能力を調べました。[14C]アセテートの存在下で成長したプロトプラストの上清媒体からのゲルろ過を使用して分離されたPGのリゾチーム消化およびL- [3H]リジンには、ペプチド架橋二量体とトリマーにKDが予想される少量のPGが含まれていました。成長するプロトプラスト培養にベンジルペニシリン(300 MUG/mL)を添加しても、合成されたPGフラグメントの正味量には影響しませんでしたが、それぞれ27および59%の二量体および三量体画分の合成の阻害をもたらしました。ペニシリンが二量体の画分の蓄積を完全に阻害しないことは、非定型形態の二量体の存在に起因していました。実際、ペニシリン処理培養の上清培地には、検出可能な量の典型的なペプチド架橋二量体が含まれていませんでした。プロトプラストPGのペプチド架橋の程度は、ほとんどの場合、無傷の連鎖球菌から分離された壁に見られるものの13%のみでした。プロトプラストの成長の初期段階と後期段階で合成されたモノマー、二量体、および三量体の相対量はほぼ同じでした。プロトプラストは、同等の量の無傷のストレプトコッチによって生成される不溶性PGに予想されるものと同じ大きさと同じ大きさの量の可溶性PGフラグメントを合成しました。

Streptococcus faecalis ATCC 9790のプロトプラストは、リゾチームの助けを借りて生成され、これらの体が可溶性のペプチド架橋ペプチドグリカン(PG)フラグメントを合成する能力を調べました。[14C]アセテートの存在下で成長したプロトプラストの上清媒体からのゲルろ過を使用して分離されたPGのリゾチーム消化およびL- [3H]リジンには、ペプチド架橋二量体とトリマーにKDが予想される少量のPGが含まれていました。成長するプロトプラスト培養にベンジルペニシリン(300 MUG/mL)を添加しても、合成されたPGフラグメントの正味量には影響しませんでしたが、それぞれ27および59%の二量体および三量体画分の合成の阻害をもたらしました。ペニシリンが二量体の画分の蓄積を完全に阻害しないことは、非定型形態の二量体の存在に起因していました。実際、ペニシリン処理培養の上清培地には、検出可能な量の典型的なペプチド架橋二量体が含まれていませんでした。プロトプラストPGのペプチド架橋の程度は、ほとんどの場合、無傷の連鎖球菌から分離された壁に見られるものの13%のみでした。プロトプラストの成長の初期段階と後期段階で合成されたモノマー、二量体、および三量体の相対量はほぼ同じでした。プロトプラストは、同等の量の無傷のストレプトコッチによって生成される不溶性PGに予想されるものと同じ大きさと同じ大きさの量の可溶性PGフラグメントを合成しました。

Protoplasts of Streptococcus faecalis ATCC 9790 were produced with the aid of lysozyme, and the ability of these bodies to synthesize soluble, peptide cross-linked peptidoglycan (PG) fragments was examined. Lysozyme digests of PG isolated using gel filtration from the supernatant medium of protoplasts grown in the presence of [14C]acetate and L-[3H]lysine contained small amounts of PG having KD expected for peptide cross-linked dimers and trimers. Addition of benzyl penicillin (300 mug/ml) to growing protoplast cultures did not affect the net amount of PG fragments synthesized but resulted in inhibition of synthesis of dimer and trimer fractions by 27 and 59%, respectively. Failure of penicillin to completely inhibit the accumulation of the dimer fraction was attributed to the presence of atypical forms of dimer. In fact, the supernatant medium of penicillin-treated cultures did not contain detectable amounts of typical peptide cross-linked dimer. The degree of peptide cross-linkage of protoplast PG was at most only 13% of that found in walls isolated from intact streptococci. The relative amounts of monomers, dimers, and trimers synthesized during early and late stages of protoplast growth was approximately the same. Protoplasts synthesized soluble PG fragments in amounts which were of the same order of magnitude as that expected for insoluble PG produced by an equivalent amount of intact streptococci.

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