環状AMP合成のアセチルコリンムスカリンM1受容体調節が、RAF活性の成長因子刺激を制御する

アセチルコリンムスカリンM2受容体（M2R）はヘテロミリックGIタンパク質に結合し、RAS/RAF/マイトジェン活性化プロテインキナーゼ経路とラット1A細胞のホスファチジルイノシトール3-キナーゼを活性化します。M2Rとは対照的に、アセチルコリンムスカリンM1受容体（M1R）の刺激は、ラット1A細胞のRAS/RAF/マイトジェン活性化プロテインキナーゼ調節経路を活性化しないが、むしろ表皮成長因子と血小板由来の成長成長の顕著な阻害を引き起こすことはない。RAFの因子受容体活性化。ラット1A細胞では、ホスホリパーゼCベータのM1R刺激と細胞内カルシウム刺激サイクリックAMP（cAMP）合成の著しい上昇により、プロテインキナーゼAが活性化されます。ホスファチジルイノシトール3-キナーゼ活性の血小板由来成長因子受容体刺激は、フォルスコリン刺激cAMP合成に応じて、M1R刺激またはプロテインキナーゼA活性化の影響を受けませんでした。成長因子に応答したRAのGTP負荷は、プロテインキナーゼA活性化の影響を受けませんでしたが、M1Rのカルバコール刺激によって部分的に阻害されました。したがって、RAS/RAF活性化インターフェイスでのプロテインキナーゼA作用は、チロシンキナーゼによって開始されたシグナル伝達ネットワークの1つの分岐のみを選択的に阻害しました。カルシウムを含むさまざまなシグナルに反応する特定のアデニリルシクラーゼは、cAMP合成を強化し、Ras.gtpに応答してRAFの活性化を調節します。まとめると、データは、Gタンパク質共役受容体がチロシンキナーゼ刺激マイトジェン反応経路の応答性を積極的かつ負の調節できることを示しています。

Acetylcholine muscarinic m2 receptors (m2R) couple to heterotrimeric Gi proteins and activate the Ras/Raf/mitogen-activated protein kinase pathway and phosphatidylinositol 3-kinase in Rat 1a cells. In contrast to the m2R, stimulation of the acetylcholine muscarinic m1 receptor (m1R) does not activate the Ras/Raf/mitogen-activated protein kinase regulatory pathway in Rat 1a cells but rather causes a pronounced inhibition of epidermal growth factor and platelet-derived growth factor receptor activation of Raf. In Rat 1a cells, m1R stimulation of phospholipase C beta and the marked rise in intracellular calcium stimulated cyclic AMP (cAMP) synthesis, resulting in the activation of protein kinase A. Stimulation of protein kinase A inhibited Raf activation in response to growth factors. Platelet-derived growth factor receptor stimulation of phosphatidylinositol 3-kinase activity was not affected by either m1R stimulation or protein kinase A activation in response to forskolin-stimulated cAMP synthesis. GTP loading of Ras in response to growth factors was unaffected by protein kinase A activation but was partially inhibited by carbachol stimulation of the m1R. Therefore, protein kinase A action at the Ras/Raf activation interface selectively inhibited only one branch of the signal transduction network initiated by tyrosine kinases. Specific adenylyl cyclases responding to different signals, including calcium, with enhanced cAMP synthesis will regulate Raf activation in response to Ras.GTP. Taken together, the data indicate that G protein-coupled receptors can positively and negatively regulate the responsiveness of tyrosine kinase-stimulated mitogenic response pathways.