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Journal of bacteriology1994Jun01Vol.176issue(12)

Caedibacter Taeniospiralis 47および116のRボディ合成とアセンブリの遺伝的決定要因の特性評価

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, U.S. Gov't, P.H.S.
概要
Abstract

パラメシウムテトラウレリアの義務的な細菌内膜存在であるカディバクターテニオスピラリスは、その宿主パラメシウムに殺害特性を与えます。51型Rボディ(屈折性包含体)は、これらの内膜によって合成され、殺害特性の発現に必要です。C. taeniospiralis 47および116について、51型Rボディ合成とアセンブリの遺伝的決定因子のヌクレオチド配列を決定しました。これまでに、これらはC. taeniospiralisの唯一の遺伝子であり、配列決定および特徴付けられます。DNA調節領域は大腸菌によって認識されており、コドンの使用は大腸菌の使用と同様に見えます。適切な調節シーケンスを備えた4番目のオープンリーディングフレームがREB軌跡内で見つかりましたが、この推定遺伝子が大腸菌で発現していることを示唆する証拠は得られませんでした。両方の株からのRボディエンコードシーケンスは同一です。欠失誘導体の二次元ゲル電気泳動は、2つの重合イベントがRボディアセンブリに関与していることを示しています。1つの重合イベントには、REBBとREBCのみが必要です。もう1つは3つのタンパク質すべてが必要です。REBCの発現は、それぞれ3つの異なる分子量を持つLEBAとREBBの種への翻訳後修飾に必要です。REBCの存在下では、異なる分子量を持つREBBの各種には6つの異なる等電点があります。

パラメシウムテトラウレリアの義務的な細菌内膜存在であるカディバクターテニオスピラリスは、その宿主パラメシウムに殺害特性を与えます。51型Rボディ(屈折性包含体)は、これらの内膜によって合成され、殺害特性の発現に必要です。C. taeniospiralis 47および116について、51型Rボディ合成とアセンブリの遺伝的決定因子のヌクレオチド配列を決定しました。これまでに、これらはC. taeniospiralisの唯一の遺伝子であり、配列決定および特徴付けられます。DNA調節領域は大腸菌によって認識されており、コドンの使用は大腸菌の使用と同様に見えます。適切な調節シーケンスを備えた4番目のオープンリーディングフレームがREB軌跡内で見つかりましたが、この推定遺伝子が大腸菌で発現していることを示唆する証拠は得られませんでした。両方の株からのRボディエンコードシーケンスは同一です。欠失誘導体の二次元ゲル電気泳動は、2つの重合イベントがRボディアセンブリに関与していることを示しています。1つの重合イベントには、REBBとREBCのみが必要です。もう1つは3つのタンパク質すべてが必要です。REBCの発現は、それぞれ3つの異なる分子量を持つLEBAとREBBの種への翻訳後修飾に必要です。REBCの存在下では、異なる分子量を持つREBBの各種には6つの異なる等電点があります。

Caedibacter taeniospiralis, an obligate bacterial endosymbiont of Paramecium tetraurelia, confers a killing trait upon its host paramecium. Type 51 R bodies (refractile inclusion bodies) are synthesized by these endosymbionts and are required for expression of the killing trait. The nucleotide sequence of the genetic determinants for type 51 R body synthesis and assembly was determined for C. taeniospiralis 47 and 116. Three independently transcribed genes (rebA, rebB, and rebC) were characterized. To date these are the only genes from C. taeniospiralis to be sequenced and characterized. DNA regulatory regions are recognized by Escherichia coli, and codon usage appears similar to that in E. coli. A fourth open reading frame with appropriate regulatory sequences was found within the reb locus, but no evidence was obtained to suggest that this putative gene is expressed in E. coli. The R body-encoding sequences from both strains are identical. Two-dimensional gel electrophoresis of deletion derivatives shows that two polymerization events are involved in R body assembly. One polymerization event requires only RebB and RebC; the other requires all three proteins. Expression of RebC is necessary for the posttranslational modification of RebA and RebB into species with three and two different molecular weights, respectively. In the presence of RebC, each species of RebB with a different molecular weight has six different isoelectric points.

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