ランゲルハンとHIT-T15細胞のラット膵島のインターロイキン-1ベータによって誘導される内因性一酸化窒素は、「彗星」アッセイで測定されるように有意なDNA損傷を引き起こします

コメットアッセイ（単一細胞ゲル電気泳動）を使用して、ランゲルハンのラット膵島およびインスリン含有HIT-T15細胞の一酸化窒素誘発DNA損傷を測定しました。一酸化窒素ドナーSIN-1による治療後に損傷は誘発されました。これはスーパーオキシドも放出しますが、外因性のスーパーオキシドジスムターゼによって減少しませんでした。これは、スーパーオキシドやペルオキシナイトライトではなく、一酸化窒素自体が活性種であることを示唆しています。一酸化窒素のDNA損傷効果は、テストされた最古の時点（15分）で簡単に検出できました。また、膵島とHIT-T15細胞の両方でサイトカインインターロイキン-1ベータによる一酸化窒素シンターゼの誘導後、損傷が生じ、基質であるアルギニンをニトロモノロノチルアルギニンに置き換えることにより防止されました。したがって、インターロイキン-1ベータ誘発性一酸化窒素シンターゼによって生成された一酸化窒素の細胞内レベルは、膵島細胞およびHIT-T15細胞にDNA損傷を引き起こすのに十分でした。

We have used the comet assay (single cell gel electrophoresis) to measure nitric oxide-induced DNA damage in rat islets of Langerhans and insulin-containing HIT-T15 cells. Damage was induced following treatment with the nitric oxide donor SIN-1, which also releases superoxide, but was not reduced by exogenous superoxide dismutase, suggesting that nitric oxide itself, rather than superoxide or peroxynitrite may be the active species. The DNA damaging effect of nitric oxide was easily detectable at the earliest time point tested (15 min). Damage also resulted following induction of nitric oxide synthase by the cytokine interleukin-1 beta in both islets and HIT-T15 cells and was prevented by replacing the substrate, arginine, with nitromonomethyl arginine. Thus intracellular levels of nitric oxide generated by interleukin-1 beta-induced nitric oxide synthase were sufficient to cause DNA damage in islet cells and HIT-T15 cells.