ホスホチロシンホスファターゼの新しい機能：GRB2-SOSを受容体チロシンキナーゼにリンクする

自己リン酸化成長因子受容体は、細胞内シグナル伝達分子のSRC相同性2ドメインの結合部位を提供します。表皮成長因子（EGF）に応答して、活性化されたEGF受容体は、シグナル伝達タンパク質GRB2およびRASグアニンヌクレオチド放出因子SOSを含む複合体に結合し、RASシグナル伝達経路の活性化につながります。血小板由来成長因子（PDGF）受容体がGRB2-SOSに結合するかどうかを調査しました。EGF受容体とは対照的に、GRB2はPDGF受容体に直接結合しません。代わりに、PDGF刺激は、GRB2を含む複合体の形成を誘導します。70-、80、および110 kDaチロシンリン酸化タンパク質。およびPDGF受容体。さらに、GRB2は70 kDaタンパク質に直接結合しますが、PDGF受容体には結合しません。チロシンリン酸化部位が変化したPDGFベータ受容体変異体のパネルを使用して、GRB2結合に必要なPDGF受容体のTYR-1009を特定しました。結合は、YXNXモチーフを含むホスホペプチドによって阻害されます。タンパク質チロシンホスファターゼSYP/PTP1D/SHPTP2/PTP2Cは約70 kDaで、TYR-1009を介してPDGF受容体に結合し、いくつかのYXNX配列が含まれています。PDGF受容体に結合し、GRB2にSYPと共感染し、抗SYP抗体によって認識される70 kDaタンパク質が認められました。さらに、PDGF刺激細胞の溶解物からのSYPとSOSの両方の免疫沈降と、GRB2はin vitroでチロシンリン酸化SYPに直接結合します。これらの結果は、GRB2が異なるメカニズムによって異なる成長因子受容体と相互作用し、細胞質ホスホチロシンホスファターゼSYPがPDGF受容体とGRB2-SOS複合体の間のアダプターとして作用することを示しています。

Autophosphorylated growth factor receptors provide binding sites for the src homology 2 domains of intracellular signaling molecules. In response to epidermal growth factor (EGF), the activated EGF receptor binds to a complex containing the signaling protein GRB2 and the Ras guanine nucleotide-releasing factor Sos, leading to activation of the Ras signaling pathway. We have investigated whether the platelet-derived growth factor (PDGF) receptor binds GRB2-Sos. In contrast with the EGF receptor, the GRB2 does not bind to the PDGF receptor directly. Instead, PDGF stimulation induces the formation of a complex containing GRB2; 70-, 80-, and 110-kDa tyrosine-phosphorylated proteins; and the PDGF receptor. Moreover, GRB2 binds directly to the 70-kDa protein but not to the PDGF receptor. Using a panel of PDGF beta-receptor mutants with altered tyrosine phosphorylation sites, we identified Tyr-1009 in the PDGF receptor as required for GRB2 binding. Binding is inhibited by a phosphopeptide containing a YXNX motif. The protein tyrosine phosphatase Syp/PTP1D/SHPTP2/PTP2C is approximately 70 kDa, binds to the PDGF receptor via Tyr-1009, and contains several YXNX sequences. We found that the 70-kDa protein that binds to the PDGF receptor and to GRB2 comigrates with Syp and is recognized by anti-Syp antibodies. Furthermore, both GRB2 and Sos coimmunoprecipitate with Syp from lysates of PDGF-stimulated cells, and GRB2 binds directly to tyrosine-phosphorylated Syp in vitro. These results indicate that GRB2 interacts with different growth factor receptors by different mechanisms and the cytoplasmic phosphotyrosine phosphatase Syp acts as an adapter between the PDGF receptor and the GRB2-Sos complex.