他のミクロソームタンパク質の非存在下での精製NADPH-シトクロムCレダクターゼによるヘム分解の触媒

Schacterらによる報告書。（J Biol Chem 247：3601、1972）NADPH-Cytochrome C oxidoreductaseに対する抗体がNADPH-シトクロムC還元酵素とヘムオキシゲナーゼ活性を阻害したことは、ラットおよび豚肝臓および脾臓ミクロソームにおけるヘムオキシゲナーゼ活性を阻害したということは、このフラボタンパク質の役割を示しました。他の研究所からの最近の研究（Yoshida et al。、J Biochem 75、1187：1974およびBissell et al。、Fed Proc 33：1246、1974）は、シトクロムP-450がヘム酸素化に関与していないことを強く示唆しています。NADPH-Cytochrome Cレダクターゼの均質な調製性の入手可能性により、ヘモタンパク質汚染を欠いているシステムでヘムオキシゲナーゼ活性をテストするようになりました。NADPH-Cytochrome Cレダクターゼは、ビリバージン還元酵素の非存在下で8.26 +/- 0.5 SEM NMOLE MIN-1MG-1の速度でビリバージン形成を触媒しました。ビリバーディンレダクターゼの存在下でのビリルビン形成の速度は、ビリバージン形成の速度の10％未満であり、ビリバーディン異性体の混合物が生成される可能性があることを示唆しています。ビリバーディンの産生はカタラーゼによって強力に（70--80％）阻害されましたが、スーパーオキシドジスムターゼの影響を受けませんでした。エピネフリンはまた、おそらくO2を利用することにより、ヘム酸素化を阻害しました。レダクターゼによるH2O2の形成に必要です。外挿により、NADPH-シトクロムCレダクターゼによるNADPHオキシダーゼ活性は、ミクロソームで発生するヘム分解を説明できます。ただし、Ixalpha位置での環状分裂の特異性は、おそらくYoshida et al。のヘムオキシゲナーゼであり、シトクロムP-450ではなく、別のミクロソームタンパク質によるものでなければなりません。

The report by Schacter et al. (J Biol Chem 247: 3601, 1972) that an antibody to NADPH-cytochrome c oxidoreductase inhibited NADPH-cytochrome c reductase and heme oxygenase activities in rat and pig liver and spleen microsomes demonstrated the role of this flavoprotein in microsomal heme oxygenation. Recent studies from other laboratories (Yoshida et al., J Biochem 75, 1187: 1974 and Bissell et al., Fed Proc 33: 1246, 1974) have strongly suggested that cytochrome P-450 is not involved in heme oxygenation. The availability of a homogeneous preparation of NADPH-cytochrome c reductase prompted us to test heme oxygenase activity in a system devoid of hemoprotein contamination. NADPH-cytochrome c reductase catalyzed biliverdin formation at a rate of 8.26 +/- 0.5 SEM nmole min-1mg-1 in the absence of biliverdin reductase. The rate of bilirubin formation in the presence of biliverdin reductase was less than 10% of the rate of biliverdin formation, suggesting that mixture of biliverdin isomers may be produced. Biliverdin production was potently (70--80%) inhibited by catalase, but was unaffected by superoxide dismutase. Epinephrine also inhibited heme oxygenation, presumably by utilizing O2. required for the formation of H2O2 by the reductase. By extrapolation, the NADPH oxidase activity due to NADPH-cytochrome c reductase can account for heme degradation occurring in microsomes. However, the specificity of ring scission at the IXalpha position must be due to another microsomal protein, perhaps the heme oxygenase of Yoshida et al., and not cytochrome P-450.