ヒト全血アッセイにおけるIL-1ベータおよびTNF-αの放出に対する抗炎症および抗アレルギー薬の効果

ヘパリン化されたヒト全血は、白血球からのIL-1ベータおよびTNF-α放出に対するさまざまなクラスの抗炎症薬の効果を研究するモデルとして評価されました。ヒト全血をZymosan（1.5 mg/ml）またはLPS（5マイクログラム/ml）で刺激して、有意なサイトカイン放出を誘導しました。前に報告されたように、5-リポキシゲナーゼ/シクロオキシゲナーゼ（5-LO/CO）阻害剤であるSKF86002（30 microM）は、いずれかの刺激を使用してIL-1ベータとTNF-αの両方の放出を有意に阻害しました。対照的に、シクロオキシゲナーゼ（CO）阻害剤（ナプロキセンおよびイブプロフェン）およびリポキシゲナーゼ（5-LO）阻害剤（Zileuton、L-663536およびBWA4C）は、IL-1ベータまたはTNF-alpha放出/生体発光に影響を与えませんでした。イソプロテレノール（ベータアゴニスト）、ロリプラム（PDE-IV阻害剤）、およびIBMX（非選択的PDE阻害剤）は、Zymosanモデルに効果がない間、LPSモデルではIL-1ベータを著しく阻害しませんでした。このヒト全血アッセイは、IL-1ベータおよびTNF-α放出/生合成の新規阻害剤を特定するために使用できるユニークで迅速な方法です。

Heparinized human whole blood was evaluated as a model to study the effects of various classes of anti-inflammatory drugs on IL-1 beta and TNF-alpha release from leukocytes. Human whole blood was stimulated with zymosan (1.5 mg/ml) or LPS (5 micrograms/ml) to induce significant cytokine release. As previously reported, the 5-lipoxygenase/cyclooxygenase (5-LO/CO) inhibitor, SKF86002 (30 microM), significantly inhibited both IL-1 beta and TNF-alpha release using either stimulus. In contrast, the cyclooxygenase (CO) inhibitors (naproxen and ibuprofen) and the lipoxygenase (5-LO) inhibitors (zileuton, L-663536 and BWA4C) did not effect IL-1 beta or TNF-alpha release/biosynthesis. Isoproterenol (beta-agonist), rolipram (a PDE-IV inhibitor), and IBMX (a nonselective PDE inhibitor), significantly inhibited TNF-alpha but not IL-1 beta in the LPS model while having no effect in the zymosan model. This human whole blood assay is a unique and rapid method which can be used to identify novel inhibitors of IL-1 beta and TNF-alpha release/biosynthesis.