黄色ブドウ球菌のメチシリン耐性株からのMECA遺伝子の部位指向変異誘発

黄色ブドウ球菌27RのMECA-27R遺伝子は、ペニシリン結合タンパク質2a（PBP2A-27R）をコードし、この株をメチシリン耐性にします。N末端膜貫通ドメインの除去または置換は、ペニシリンの結合には影響しませんでしたが、推定トランスグリコシラーゼドメイン（膜貫通領域後の144、245、または341アミノ酸）の部分の除去はペニシリン結合活性を破壊しました。すべてのペニシリン相互作用酵素に存在するSXXK、SXN、およびKSGモチーフは、PBP2A-27Rの推定トランスペプチダーゼ領域内の予想される線形空間配置で発見されました。これら3つのモチーフすべてのアミノ酸の変化は、ペニシリン結合活性の除去をもたらし、ペニシリンとの相互作用における役割を確認しました。

The mecA-27r gene from Staphylococcus aureus 27r encodes penicillin-binding protein 2a (PBP2a-27r), which causes this strain to be methicillin resistant. Removal or replacement of the N-terminal transmembrane domain had no effect on binding of penicillin, but removal of portions of the putative transglycosylase domain (144, 245, or 341 amino acids after the transmembrane region) destroyed penicillin-binding activity. The SXXK, SXN, and KSG motifs, present in all penicillin-interacting enzymes, were found in the expected linear spatial arrangement within the putative transpeptidase region of PBP2a-27r. Alterations of amino acids in all three of these motifs resulted in elimination of penicillin-binding activity, confirming their roles in the interaction with penicillin.