穴、大腸菌のDNAポリメラーゼIIIのシータサブユニットをコードする遺伝子：穴変異体の特性評価とDNAQ（エプシロンサブユニット）変異体との比較

DNAポリメラーゼIIIホロエンザイムは、大腸菌とサルモネラTyphimuriumの染色体複製の大部分に関与するマルチタンパク質複合体です。ホロ酵素の触媒コアは、ポリメラーゼサブユニット（アルファ; DNAE）と校正サブユニット（Epsilon; DNAQ）の両方を組み込んだアルファイプシロンシータヘテロトリマーです。シータの役割は不明です。ここでは、穴のヌル変異、シータの遺伝子について説明します。この突然変異を運ぶ株は完全に実行可能であり、変異体の表現型を示しませんでした。対照的に、DNAQヌル変異体は、前述のS. TyphimuriumのDNAQヌル変異体のように、不十分な成長、慢性SOS誘導、および自発的変異率の上昇を示しました。貧弱な成長は、S。typhimuriumで同定された抑制変異と同一のアルファに影響を与える突然変異によって抑制可能でした。穴とDNAQの両方の二重変異ヌルは、DNAQ単一変異体と区別できませんでした。これらの結果は、シータサブユニットがDNAQ+と変異DNAQの両方のバックグラウンドで分配され、イプシロン変異体の表現型はシータ機能への干渉に基づいて説明できないことを示しています。

DNA polymerase III holoenzyme is a multiprotein complex responsible for the bulk of chromosomal replication in Escherichia coli and Salmonella typhimurium. The catalytic core of the holoenzyme is an alpha epsilon theta heterotrimer that incorporates both a polymerase subunit (alpha; dnaE) and a proofreading subunit (epsilon; dnaQ). The role of theta is unknown. Here, we describe a null mutation of holE, the gene for theta. A strain carrying this mutation was fully viable and displayed no mutant phenotype. In contrast, a dnaQ null mutant exhibited poor growth, chronic SOS induction, and an elevated spontaneous mutation rate, like dnaQ null mutants of S. typhimurium described previously. The poor growth was suppressible by a mutation affecting alpha which was identical to a suppressor mutation identified in S. typhimurium. A double mutant null for both holE and dnaQ was indistinguishable from the dnaQ single mutant. These results show that the theta subunit is dispensable in both dnaQ+ and mutant dnaQ backgrounds, and that the phenotype of epsilon mutants cannot be explained on the basis of interference with theta function.