ウサギ大動脈の弛緩反応: シトクロム P450 阻害剤の影響

阻害剤の使用に基づいて、シトクロム P450 は、アラキドン酸 (AA) の代謝を介した内皮依存性弛緩反応に関与していると考えられています。しかし、チトクロム P450 およびその AA 代謝産物の血管緊張の調節への寄与は、血管への影響に関して広範に特徴づけられていないチトクロム P450 阻害剤の特異性の問題もあり、確立されていません。その結果、我々は、シトクロム P450 および/または AA 代謝の阻害に関係のない作用を決定するために、異なる伝達機構を利用する薬剤に対するフェニレフリン収縮したウサギの大動脈輪の血管弛緩反応に対するいくつかの阻害剤の効果に取り組みました。脂肪酸のシトクロム P450 代謝の機構に基づく阻害剤であるオクタデシン酸 (2.5 および 5 μM)、および AA 代謝の阻害剤であるエイコサテトラエン酸 (10 および 20 μM) は、アセチルコリン、ニトロプルシドナトリウム、イソプロテレノールおよびジアゾキシドに対する血管弛緩反応には影響を与えませんでした。シトクロム P450 の基質である 7-エトキシレゾルフィン (2-10 μM)、および酵素のヘム部分に結合するクロトリマゾール (2.5-10 μM) は、アセチルコリンに対する反応を濃度依存的に減少させましたが、他のアゴニストは減少させず、一酸化窒素合成に対する影響を示しましたが、どちらも内皮細胞による L-アルギニンから L-シトルリンへの変換には影響を与えませんでした。阻害中間体に代謝されるシトクロム P450 の典型的な阻害剤である SKF 525A (50 ～ 200 マイクロ M) も、アセチルコリンに対する反応を低下させ、さらに、イソプロテレノールとジアゾキシドの血管弛緩活性を損ないました。

Based on the use of inhibitors, cytochrome P450 has been implicated in endothelium-dependent relaxant responses via metabolism of arachidonic acid (AA). However, the contribution of cytochrome P450 and its AA metabolites to the regulation of vascular tone has not been established due, in part, to questions of specificity of cytochrome P450 inhibitors which have not been extensively characterized in terms of their vascular effects. Consequently, we addressed the effects of several inhibitors on vasorelaxant responses of phenylephrine-contracted, rabbit, aortic rings to agents that utilize different transduction mechanisms to determine any actions unrelated to inhibition of cytochrome P450 and/or AA metabolism. Octadecynoic acid (2.5 and 5 microM), a mechanism-based inhibitor of cytochrome P450 metabolism of fatty acids, and eicosatetrayenoic acid (10 and 20 microM), an inhibitor of AA metabolism, were without effect on vasorelaxant responses to acetylcholine, sodium nitroprusside, isoproterenol and diazoxide. 7-Ethoxyresorufin (2-10 microM), a substrate for cytochrome P450, and clotrimazole (2.5-10 microM) which binds to the heme moiety of the enzyme, concentration-dependently reduced responses to acetylcholine but not the other agonists indicating an effect on nitric oxide synthesis although neither affected the conversion of L-arginine to L-citrulline by endothelial cells. SKF 525A (50-200 microM), the prototypical inhibitor of cytochrome P450, which is metabolized to an inhibitory intermediate, also reduced responses to acetylcholine and, in addition, impaired the vasorelaxant activities of isoproterenol and diazoxide.