ギャップのN末端領域は、細胞骨格構造と細胞接着を調節します

RAS GTPase活性化タンパク質（GAP）は、GTP結合RAと相互作用するC末端ドメインと、2つのSH2ドメインとSH3ドメインを含むN末端領域を所有しています。RASとの関連に加えて、ギャップは安定して自己リン酸化ベータPDGF受容体に結合し、2つの細胞質リンタンパク質、P62、RNA結合タンパク質、およびRHO/RAChファミリーの小グラニンヌクレオチド結合タンパク質に向けてギャップ活性を持っているP190に結合します。これらの相互作用を細胞リンタンパク質と媒介するギャップの領域を定義し、これらの複合体の生物学的意義を調査するために、残基1-445を含む切り捨てられたギャップポリペプチド（GAP-N）は、ラット-2線維芽細胞で安定して発現しました。GAP-NにはSH2ドメインとSH3ドメインが含まれていますが、RAS GTPaseアクティブ化ドメインがありません。PDGFとGAP-Nを発現する細胞の刺激により、GAP-NとベータPDGF受容体との関連性、およびチロシン上のGAP-Nのリン酸化は、in vivoでの自己リン酸化ベータPDGF受容体に直接結合するという概念と一致しています。GAP-Nは、血清不足および成長因子刺激細胞の両方で、P190に構成的に結合しました。このGAP-N-P190複合体は、in vitroでRhoギャップ活性を持っていました。ラット-2細胞におけるGAP-Nの発現は、細胞骨格および細胞接着の変化と相関しており、作用応力繊維の破壊、焦点接点の減少、およびフィブロネクチンに付着する能力の障害に相関していました。これらの結果は、ギャップのN末端ドメインがin vivoで細胞リンタンパク質との相互作用を誘導し、それによって細胞骨格と細胞接着を調節するエフェクター関数を発揮できることを示唆しています（250語で切り捨てられた抽象的な）

Ras GTPase activating protein (GAP) possesses a C-terminal domain that interacts with GTP-bound Ras, and an N-terminal region containing two SH2 domains and an SH3 domain. In addition to its association with Ras, GAP binds stably to autophosphorylated beta PDGF receptors, and to two cytoplasmic phosphoproteins: p62, an RNA binding protein, and p190, which possesses GAP activity towards small guanine nucleotide binding proteins in the Rho/Rac family. To define the region of GAP that mediates these interactions with cellular phosphoproteins, and to investigate the biological significance of these complexes, a truncated GAP polypeptide (GAP-N) containing residues 1-445 was stably expressed in Rat-2 fibroblasts. GAP-N contains the SH2 and SH3 domains, but lacks the Ras GTPase activating domain. Stimulation of cells expressing GAP-N with PDGF induced association of GAP-N with the beta PDGF receptor, and phosphorylation of GAP-N on tyrosine, consistent with the notion that GAP SH2 domains direct binding to the autophosphorylated beta PDGF receptor in vivo. GAP-N bound constitutively to p190 in both serum-deprived and growth factor-stimulated cells. This GAP-N-p190 complex had Rho GAP activity in vitro. The expression of GAP-N in Rat-2 cells correlated with changes in the cytoskeleton and in cell adhesion, typified by the disruption of action stress fibres, a reduction in focal contacts, and an impaired ability to adhere to fibronectin. These results suggest that the N-terminal domain of GAP can direct interactions with cellular phosphoproteins in vivo, and thereby exert an effector function which modulates the cytoskeleton and cell adhesion.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)