ヒト肝臓クエン酸サイクルプローブフェニルアセチルグルタミンと、ガスクロマトグラフィーマス分光測定による血漿中のフェニルアセテートのアッセイ

フェニルアラニンに由来するフェニルアセテートは、ヒトおよび霊長類の肝臓でフェニルアセチルグルタミンに変換されます。後者は、肝臓のクエン酸サイクル中間体の標識パターンを評価するために使用されています。生物液中のフェニルアセチルグルタミン、フェニルアセテート、フェニルアラニンのガスクロマトグラフィーマス分析アッセイを提示します。化合物は、ジメチルホルムアミドジメチルアセタールで誘導体化されています。検出限界は、フェニルアセチルグルタミンとフェニルアセテートで0.1 nmol、フェニルアラニンでは2 nmolです。それぞれベースライン血漿濃度のフェニルアセテートとフェニルアセチルグルタミンおよび1および3ミクロム。フェニルアセテートとフェニルアセチルグルタミンの24時間の尿排出は、それぞれ約4ムモールと1 mmolです。ヒトによるフェニルアラニン（アスパルテームの形で）の摂取に続いて、血漿および尿中のフェニルアセテートとフェニルアセチルグルタミン濃度の連続的な増加が続きます。このアッセイは、ヒトの肝臓クエン酸サイクル中間体の13Cラベルパターンの非侵襲的プローブへの道を開きます。

Phenylacetate, derived from phenylalanine, is converted in human and primate liver to phenylacetylglutamine. The latter has been used to assess the labeling pattern of liver citric acid cycle intermediates. We present gas chromatographic-mass spectrometric assays of phenylacetylglutamine, phenylacetate, and phenylalanine in biological fluids. The compounds are derivatized with dimethylformamide dimethyl acetal. Limits of detection are 0.1 nmol for phenylacetylglutamine and phenylacetate and 2 nmol for phenylalanine. Baseline plasma concentrations of phenylacetate and phenylacetylglutamine and 1 and 3 microM, respectively. The 24-h urinary excretions of phenylacetate and phenylacetylglutamine are about 4 mumol and 1 mmol, respectively. Ingestion of phenylalanine (in the form of aspartame) by a human is followed by sequential increases in phenylacetate and phenylacetylglutamine concentrations in plasma and urine. This assay opens the way to noninvasive probing of the 13C-labeling pattern of liver citric acid cycle intermediates in humans.