正常なヒト中皮細胞の周りのヒアルロン酸含有コートの合成とアセンブリ

この研究では、正常なヒト中皮（NHM）細胞とヒト悪性中皮腫細胞の能力を調べて、ヒアルロンを含む切除周辺マトリックスまたは「コート」を形成しました。細孔コートのアセンブリは、粒子除外アッセイによって視覚化されました。NHM細胞の周りに大きなヒアルロンを含むコートが形成され、その変換されたカウンターパートにはコートがないか、非常に限られたコートが形成されていることがわかりました。コートは、ヒアルロン酸を特異的に分解するストレプトミセスヒアルロニダーゼによる治療により除去されました。NHM細胞は、播種後5時間以内にヒアルロンを含む周胞性マトリックスを示しました。コートの形成は、血小板由来の成長因子と表皮成長因子によって刺激されました。興味深いことに、ヒアルロナン依存性周囲マトリックスの集合は、ヒアルロン酸dodecasac糖の添加により阻害されました。コートの形成に対する阻害効果は、ペリセルラーマトリックスの不安定化によるものであり、ヒアルロナン合成に対するヒアルロナンドデカサク糖の阻害効果によるものではありませんでした。対照的に、ポリマーヒアルロン酸とその細胞表面受容体との相互作用の阻害剤であるヒアルロン酸ヘキサ糖は、コートのサイズに影響を与えませんでした。したがって、我々の結果は、NHM細胞を囲む周囲マトリックスが、細胞から押し出され、細胞表面上のヒアルロン受容体から独立している新しく合成されたヒアルロンで構成されている可能性と互換性があります。コートは、相互作用（ヒアルロナン - ヒアロナンまたはヒアルロン酸大プロテインブリッジ）によって安定化されているようです。

In this study we examined the capacity of normal human mesothelial (NHM) cells and human malignant mesothelioma cells to form hyaluronan-containing pericellular matrices or "coats." The assembly of the pericellular coats was visualized by a particle exclusion assay. We found that large hyaluronan-containing coats were formed around NHM cells whereas their transformed counterparts had no or very limited coats. The coats were removed by treatment with Streptomyces hyaluronidase, which specifically degrades hyaluronan. NHM cells exhibited hyaluronan-containing pericellular matrix within 5 h after seeding. The formation of the coats was stimulated by platelet-derived growth factor and epidermal growth factor. Interestingly, the assembly of the hyaluronan-dependent pericellular matrices was inhibited by the addition of hyaluronan dodecasaccharides. The inhibitory effect on the formation of the coats was due to a destabilization of pericellular matrix and not due to an inhibitory effect of hyaluronan dodecasaccharides on hyaluronan synthesis. In contrast, hyaluronan hexasaccharides, an inhibitor of the interaction between polymeric hyaluronan and its cell surface receptors, had no effect on the size of the coat. Thus, our results are compatible with the possibility that the pericellular matrix surrounding NHM cells consists of newly synthesized hyaluronan which is extruded from the cell and independent of hyaluronan receptors on the cell surface. The coat seems to be stabilized by interactions (hyaluronan-hyaluronan or hyaluronan-protein bridges) which can be prevented by hyaluronan dodecasaccharides.