ガダム、シルド、チェンプルソフ方程式を使用した機能的阻害曲線からの競合拮抗薬親和性の推定

1.固定アゴニスト濃度の効果が拮抗薬濃度（「機能的阻害曲線」）によって減少する機能実験からの拮抗薬親和性の推定は、理論的および実験的視点の両方から考慮されています。2.理論的予測は、アセチルコリンによる[35S] -GTPガンマS結合の刺激から得られた結果と比較されます。ピレンゼピンおよびAQ-RA741。3。Cheng-Prusoff補正を適用する通常の手順は理論的に無効であることが示されており、この手順に関連するエラーのサイズと分布の予測が行われます。4.用量比分析の原理を使用し、ガダム方程式の使用に類似した拮抗薬親和性を推定するための別の手順は、正確で理論的に有効であることがわかります。5.新しい分析方法により、アンタゴニスト阻害曲線とアゴニストの活性化曲線を非線形の形式（Waudで導出）の形式（Waudによって導出）の形に直接適合することにより、拮抗薬の親和性とSchild勾配の両方の正確な推定が可能になります。回帰分析。6.データの一部を阻害曲線のファミリーとして扱い、阻害曲線から推定されるシルドプロットの用量分析を含めることにより、従来のシルド分析を強化できることが示されています。

1. The estimation of antagonist affinity from functional experiments in which the effect of a fixed agonist concentration is reduced by a range of antagonist concentrations ('functional inhibition curves') has been considered from both a theoretical and experimental viewpoint. 2. Theoretical predictions are compared with results obtained from the stimulation of [35S]-GTP gamma S binding by acetylcholine to membranes of Chinese hamster ovary (CHO) cells stably transfected with human m1-m4 muscarinic receptors, and inhibition of the stimulated binding by pirenzepine and AQ-RA 741. 3. The usual procedure of applying the Cheng-Prusoff correction is shown to be theoretically invalid, and predictions are made of the size and distribution of errors associated with this procedure. 4. A different procedure for estimating antagonist affinity, using the principles of dose-ratio analysis and analogous to use of the Gaddum equation, is found to be accurate and theoretically valid. 5. A novel method of analysis allows accurate estimation of both antagonist affinity and Schild slope, by fitting the combined data from an antagonist inhibition curve and an agonist activation curve directly to a form of the Schild equation (derived by Waud) using non-linear regression analysis. 6. It is shown that the conventional Schild analysis can be enhanced by treating part of the data as a family of inhibition curves and including in the Schild plot dose-ratios estimated from the inhibition curves.