原発性ヒヒ肝細胞におけるアポリポタンパク質の細胞内成熟[A]およびリポタンパク質[A]の集合[A]

糖タンパク質アポリポタンパク質[a]（apo [a]）は、血漿に非常に多様な濃度で存在し、低密度リポタンパク質のApoB-100に関連するジスルフィドに関連するジスルフィドとリポプロタインを産生する多くの遺伝的に決定されたサイズのアイソフォーム（400〜800 kDa）として現れます。[a]（lp [a]）。apo [a]は肝臓によって合成されますが、apo [a]とその生産を調節するapobの関連性の部位は不明です。LP [a]粒子の形態形成を調べるために、アポの単一の低分子量アイソフォームを発現するヒヒ肝細胞を[35S]システインとメチオニンで標識し、apo [a]を免疫沈降およびSDS-pageによって分析しました。。定常状態の標識により、細胞内の2つの分子量型のapo [a]が明らかになりました。培地から大きな形のみが回収されました。パルスチェースの研究とエンドグリコシダーゼ治療により、Apo [a]の低分子量型は、小胞体または初期のゴルジコンパートメントに長期にわたる滞留時間を持つ前駆体を表し、その後成熟した形に処理されたことが明らかになりました。Apo [a]の成熟した形態の一部は、合成後に急速に分泌されましたが、残りは後期ゴルジコンパートメントで長期にわたる滞留時間を持っていました。すべての実験では、ApoBは培地からApo [a]と共沈みましたが、細胞溶解物からではありませんでした。密度勾配の超遠心分離と免疫ブロット分析により、apo [a]の大部分が自由形で培地に分泌されたことが明らかになり、apo [a]とapobの関連が分泌後に発生したことが示唆されました。細胞内コンパートメント間のapo [a]の動きの調節は、LP [a]の血漿レベルに影響を与えるメカニズムの1つである可能性があります。

The glycoprotein apolipoprotein[a] (apo[a]) is present in plasma at highly variable concentrations and appears as a number of genetically determined size isoforms (400-800 kDa), disulfide linked to apoB-100 in low density lipoprotein to produce lipoprotein [a](Lp[a]). Apo[a] is synthesized by the liver, but the site of association of apo[a] and apoB and factors that regulate its production are unknown. To examine the morphogenesis of the Lp[a] particle, baboon hepatocytes expressing a single, low molecular weight isoform of apo[a] were labeled with [35S]cysteine and methionine, and apo[a] was analyzed by immunoprecipitation and SDS-PAGE. Steady-state labeling revealed two molecular weight forms of apo[a] inside the cell. Only the large form was recovered from the culture medium. Pulse-chase studies and endoglycosidase treatment revealed that the lower molecular weight form of apo[a] represented a precursor with a prolonged residence time in the endoplasmic reticulum or an early Golgi compartment, after which it was processed to the mature form. A proportion of the mature form of apo[a] was rapidly secreted after synthesis, whereas the remainder had a prolonged residence time in a late Golgi compartment. In all experiments, apoB co-precipitated with apo[a] from the culture medium, but not from cell lysates. Density gradient ultracentrifugation and immunoblot analysis revealed that the majority of apo[a] was secreted into the medium in a free form, suggesting that the association between apo[a] and apoB occurred after secretion. Regulation of the movement of apo[a] between intracellular compartments may be one mechanism by which the plasma levels of Lp[a] are influenced.