ショウジョウバエポリ（ADP-リボース）ポリメラーゼをコードするcDNAのクローニング：自動修飾ドメインのロイシンジッパー

ショウジョウバエの部分cDNAフラグメントを使用してラムダGT11 cDNAライブラリーをスクリーニングすることにより、ショウジョウバエポリ（ADP-リボース）ポリメラーゼ（PARP; EC 2.4.2.30）のcDNAクローンを分離しました。ショウジョウバエPARPプローブは、哺乳類、鶏肉、両生類、および魚シーケンスの保存されたアミノ酸から推定された異種プライマーとのポリメラーゼ連鎖反応によって得られました。ショウジョウバエPARP mRNAの長さは3.2 kbで、発達の初期段階で発現しています。994アミノ酸のPARPタンパク質には、2つの亜鉛フィンガーモチーフと、異なる種の間で保存されているNAD結合モチーフが含まれています。興味深いことに、アルファヘリックスでヘプタッドロイシンの繰り返しはショウジョウバエParpで発見されました。さまざまな種の自動修飾ドメインのアライメントは、哺乳類と鶏のシーケンスでコイルドコイルの構成を作るヘリックスの同じ表面に繰り返される疎水性アミノ酸を示しました。自動修飾ドメインにロイシンジッパーモチーフが存在することは、このモチーフがPARPと生理学的アクセプター間のタンパク質間相互作用の原因である可能性があることを示唆しています。PARPには、おそらく他の核ロイシンジッパータンパク質とのホモおよび/またはヘテロ二量体化とADPリボシル化によるその調節が含まれる新しい機能がある場合があります。

We have isolated cDNA clones for a Drosophila poly(ADP-ribose) polymerase (PARP; EC 2.4.2.30) by screening a lambda gt11 cDNA library with a Drosophila partial cDNA fragment. The Drosophila PARP probe was obtained by the polymerase chain reaction with heterologous primers deduced from conserved amino acids in the mammalian, chicken, amphibian, and fish sequences. The Drosophila PARP mRNA is 3.2 kb in length and is expressed in the early stages of development. The PARP protein of 994 amino acids contains two zinc-finger motifs and an NAD-binding motif, which are conserved among different species. Interestingly, the heptad leucine repeat in an alpha-helix was found in Drosophila PARP. Alignments of the auto-modification domains of various species showed the repeated hydrophobic amino acids on the same face of the helix that make the coiled-coil configuration in the mammalian and chicken sequences. The presence of a leucine-zipper motif in the auto-modification domain suggests that this motif might be responsible for protein-protein interaction between PARP and physiological acceptors. PARP may have novel functions, possibly involving its homo- and/or heterodimerization with other nuclear leucine-zipper proteins and its regulation by ADP-ribosylation.