ヒト5,10-メテニルテトラヒドロ葉酸シンテターゼをコードするcDNAのクローンと特性評価

メテニルテトラヒドロ葉酸シンテターゼ（MTHFS）は、5-フォルミルテトラヒドロ葉酸の他の還元された溶融への細胞内変換における必須の初期代謝ステップを触媒します。長さ872 bpのヒトMTHFS cDNAと、23,229 daの203アミノ酸タンパク質のコードを分離して配列決定しました。MTHFSをコードする開いている読み取りフレームを含むPET11Cプラスミドをトランスフェクトした大腸菌BL21（DE3）は、IPTG誘導後の細菌抽出物におけるMTHFS活性の100倍の増加を示しました。ヒト組織のノーザンブロット研究は、MTHFS mRNAが肝臓で優先的に発現し、ヒトゲノムDNAのサザンブロット分析が単一コピー遺伝子の存在を示唆していることを決定しました。

Methenyltetrahydrofolate synthetase (MTHFS) catalyses the obligatory initial metabolic step in the intracellular conversion of 5-formyltetrahydrofolate to other reduced folates. We have isolated and sequenced a human MTHFS cDNA which is 872-bp long and codes for a 203-amino-acid protein of 23,229 Da. Escherichia coli BL21(DE3), transfected with pET11c plasmids containing an open reading frame encoding MTHFS, showed a 100-fold increase in MTHFS activity in bacterial extracts after IPTG induction. Northern blot studies of human tissues determined that the MTHFS mRNA was expressed preferentially in the liver and Southern blot analysis of human genomic DNA suggested the presence of a single-copy gene.