プロスタグランジンE2の機能的特性化誘導性骨形成コロニー形成ユニット新生児ラットカルバリウムから分離された細胞の培養物

プロスタグランジンE2（PGE2）は、ラットカルバリアル（RC）細胞の培養で形成される鉱化結節の数を増加させます。私たちの研究の目的は、PGE2誘導性の骨形成コロニー形成ユニット（CFU-OS）を特徴付けることでした（CFU-OS）、それらの数、それらが放出された細胞集団、PGE2に対する特定の応答期間、およびPGE2の刺激下での増殖と分化の特性を特徴付けることでした。制限希釈分析を使用して、PGE2誘導性のCFU-O-OSの数を決定しました。PGE2誘導性CFU-OSが存在している細胞集団を推定するために使用されたRC細胞の5つのサブポピュレーションを分離したコラゲナーゼを使用した無傷のラット頭頂骨の連続消化。PGE2へのPGE2誘導性CFU-OSの応答期間は、1〜10、11-20、および21-30日のすべての可能な組み合わせで混合RC細胞の培養を処理することにより評価されました。CFU-OSの増殖と分化に対するPGE2の影響は、3日目、6、および9日目に亜集合体IおよびIVのDNA合成とAP活性を比較することにより評価されました。最小消化期間、（3）PGE2誘導性CFU-OSの応答は、培養の最初の10日間に限定され、（4）PGE2刺激結節形成は、DNA合成の早期増加とアルカリホスファターゼ活性の持続的な増加に関連しています。機能的には、PGE2誘導性のCFU-OSは、主に亜集団III-Vに見られるAP陰性細胞を徐々に増殖させていると結論付けています。PGE2はそれらを刺激して増殖し、AP+になり、in vitroで鉱化された結節を形成するために決定されたCFU-OSとして機能します。

Prostaglandin E2 (PGE2) increases the number of mineralized nodules that form in cultures of rat calvarial (RC) cells. The purpose of our study was to characterize PGE2-inducible osteogenic colony forming units (CFU-Os) by determining their number, the cell populations from which they were released, their specific responsive period to PGE2, and their proliferating and differentiating characteristics under the stimulation of PGE2. Limiting dilution analysis was used to determine the number of PGE2-inducible CFU-Os. Sequential digestion of intact rat parietal bones with collagenase isolated 5 subpopulations of RC cells that were used to estimate the cell populations where PGE2-inducible CFU-Os resided. The responsive period of PGE2-inducible CFU-Os to PGE2 was evaluated by treating cultures of mixed RC cells for all possible combinations of days 1-10, 11-20, and 21-30. PGE2 effects on proliferation and differentiation of CFU-Os were evaluated by comparing the DNA synthesis and AP activity in subpopulations I and IV on days 3, 6, and 9. Results showed: (1) PGE2-inducible CFU-Os represent 0.27% of cells in the mixed RC population, (2) the majority of determined and PGE2-inducible CFU-Os were found in the subpopulations released during the 60-100 min digestion periods, (3) the response of PGE2-inducible CFU-Os is limited to the first 10 days of culture, and (4) PGE2-stimulated nodule formation is associated with an early increase in DNA synthesis and a sustained increase in alkaline phosphatase activity. We conclude that, functionally, PGE2-inducible CFU-Os are slowly proliferating AP negative cells primarily found in the subpopulations III-V. PGE2 stimulates them to proliferate and become AP+, and function as determined CFU-Os to form mineralized nodules in vitro.