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すると翻訳の精度が向上します
O2の張力の低下は、チロシンヒドロキシラーゼ（TH）のmRNAの分解速度を遅らせ、カテコールアミン合成における速度制限酵素、甲状腺細胞腫（PC12）クローン細胞株。観察された半減期の増加（30時間対10時間）は、th mRNA（低酸素誘導性プロタイン部位（HIPBS）の3つの翻訳領域1552 1578の間に位置する66 kDaタンパク質（低酸素誘導性タンパク質）のピリミジン豊富な領域への結合の強化と相関しています。本研究では、最初にハイプスの特定の切断と、アンチセンスオリゴオキシヌクレオチドとRNase Hを含むその隣接配列を使用し、次に結合特性の変異解析を使用することにより、27塩基のタンパク質結合部位を調査します。27塩基のHipbsオリゴリボヌクレオチドは、低酸素刺激的な方法でin vitroでタンパク質を結合するのに十分であることがわかりました。さらに、モチーフ（U/C）（C/U）CCCUで表される最適な低酸素誘導性タンパク質結合部位を特定しました。ここで、コア結合部位は下線付きのサイトジンによって示されます。プリンまたはウリジンを含むサイトジンのいずれかのいずれかのいずれかの置換により、タンパク質結合が廃止されました。結合を部分的に減少させたHipbs内の変異は、低酸素細胞からの抽出物のタンパク質結合の刺激を妨げませんでした。低酸素誘発性複合体形成の増加は、正常酸素細胞からのタンパク質を使用した結合の強度に比例しました。HIPBS要素は、異なる種に由来するmRNAで保存されています。
O2の張力の低下は、チロシンヒドロキシラーゼ（TH）のmRNAの分解速度を遅らせ、カテコールアミン合成における速度制限酵素、甲状腺細胞腫（PC12）クローン細胞株。観察された半減期の増加（30時間対10時間）は、th mRNA（低酸素誘導性プロタイン部位（HIPBS）の3つの翻訳領域1552 1578の間に位置する66 kDaタンパク質（低酸素誘導性タンパク質）のピリミジン豊富な領域への結合の強化と相関しています。本研究では、最初にハイプスの特定の切断と、アンチセンスオリゴオキシヌクレオチドとRNase Hを含むその隣接配列を使用し、次に結合特性の変異解析を使用することにより、27塩基のタンパク質結合部位を調査します。27塩基のHipbsオリゴリボヌクレオチドは、低酸素刺激的な方法でin vitroでタンパク質を結合するのに十分であることがわかりました。さらに、モチーフ（U/C）（C/U）CCCUで表される最適な低酸素誘導性タンパク質結合部位を特定しました。ここで、コア結合部位は下線付きのサイトジンによって示されます。プリンまたはウリジンを含むサイトジンのいずれかのいずれかのいずれかの置換により、タンパク質結合が廃止されました。結合を部分的に減少させたHipbs内の変異は、低酸素細胞からの抽出物のタンパク質結合の刺激を妨げませんでした。低酸素誘発性複合体形成の増加は、正常酸素細胞からのタンパク質を使用した結合の強度に比例しました。HIPBS要素は、異なる種に由来するmRNAで保存されています。
Reduced tension of O2 slows the degradation rate of mRNA for tyrosine hydroxylase (TH), the rate-limiting enzyme in catecholamine synthesis, in the pheochromocytoma (PC12) clonal cell line. The observed increase in half-life (30 h versus 10 h) correlates with enhanced binding of a 66-kDa protein (hypoxia inducible protein) to the pyrimidine-rich tract located between bases 1552 1578 in the 3 -untranslated region of TH mRNA (hypoxia-inducible protein binding site (HIPBS)). The present study investigates the protein binding site within the 27-base HIPBS, first by using specific cleavages of HIPBS and its flanking sequences with antisense oligodeoxynucleotides and RNase H and then by using mutational analysis of the binding properties. We found that the 27-base HIPBS oligoribonucleotide was sufficient to bind the protein in vitro in a hypoxia-stimulated manner. We further identified the optimal hypoxia-inducible protein binding site that is represented by the motif (U/C)(C/U)CCCU, where the core binding site is indicated by the underlined cytidines. Substitutions of either one of the cytidines with purine or uridine abolished the protein binding. The mutations within HIPBS, which partially reduced binding, did not prevent stimulation of protein binding for extracts from hypoxic cells. The hypoxia-induced increase in complex formation was proportional to the strength of binding using proteins from normoxic cells. The HIPBS element is conserved in TH mRNAs derived from different species.
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