調節されたアデノウイルスpre-mRNAのスプライシングのSRタンパク質による阻害

アデノウイルスL1ユニットは、5 'スプライスを2つの代替3'スプライスサイトのいずれかに接合し、52,55KまたはIIIA mRNAを生成する代替のスプライスされた前駆体メッセンジャー（pre-mRNA）の例を表しています（図1A）。遠位IIIA 3 'スプライス部位の効率的な使用には、ウイルス性タンパク質合成が必要であるため、ウイルス感染の後期に限定されます。ここでは、感染していない細胞からの抽出物で、本質的なスプライシング因子である古典的なSRタンパク質が、イントロンリポッレッサー要素に結合し、U2小さな核リボ核タンパク質粒子のスプリセソームへの動員を防ぐことにより、IIIA前mRNAスプライシングを阻害します。さらに、ウイルスリプレッサー要素には、前mRNAに適切に配置されたときにスプライシングエンハンサーアクティビティがあることを示します。一緒に、我々の結果は、SRタンパク質が、それらが結合する前mRNAのどこにあるかに応じて、スプライシングの活性化因子またはリポッレッサーとして機能することを示しています。

The adenovirus L1 unit represents an example of an alternatively spliced precursor messenger (pre-mRNA) where on 5' splice can be jointed to one of two alternative 3' splice sites, producing the 52,55K or the IIIa mRNAs (Fig. 1a). Efficient usage of the distal IIIa 3' splice site requires late viral protein synthesis and is therefore confined to the late phase of virus infection. Here we show that, in extracts from uninfected cells, the classical SR proteins, which are essential splicing factors, inhibit IIIa pre-mRNA splicing by binding to an intronic repressor element and preventing recruitment of the U2 small nuclear ribonucleoprotein particle to the spliceosome. We further show that the viral repressor element has splicing-enhancer activity when appropriately placed in the pre-mRNA. Together, our results demonstrate that SR proteins function as activators or repressors of splicing depending on where on the pre-mRNA they bind.