LPS前処理後のマクロファージによるLPS刺激サイトカイン遺伝子転写および分泌の不一致の再プログラミング

調節不全のマクロファージ（MPHI）サイトカインの放出は、全身性炎症中に発生し、臓器不全の素因となる可能性があります。低用量LPSPを備えたin vitroでMPHIS前処理（prERX）が「再プログラム」され、その後のLPS活性化（LPSA）に応じてより少ないTNFとより多くのIL-1を放出することを示しました。本研究では、このLPSPの「再プログラミング」のMPHIサイトカイン遺伝子転写に対する効果を調査しました。マウス腹膜滲出液MPHIは、in vitro 48時間で培養され、次にLPSPの24時間+/- 100 ng/mlで培養されました。培養物を0-1000 ng/ml LPSAおよび6時間上清TNFで刺激し、IL-1は特定のバイオアッセイを使用して測定しました。サイトカイン遺伝子転写は、RT-PCRを使用してLPSAの6時間後に推定されました。LPSPを伴うPrerxはTNFを阻害し、LPSAによるIL-1放出を増強しました。LPSPを伴うPrerxは、サイトカイン遺伝子転写を有意に阻害しました。ただし、TNFとIL-1の両方のメッセージは、高用量LPSA後に検出可能でした。ほとんどのLPSA濃度によるIL-1転写のLPSP阻害にもかかわらず、IL-1タンパク質はPrERXによって増強されました。高用量LPSAは、サイトカイン遺伝子転写のLPSPを再プログラムした阻害をオーバーライドできますが、LPSP後のTNFおよびIL-1タンパク質放出の変化は、転写後に調節される可能性があります。

Dysregulated macrophage (Mphi) cytokine release occurs during systemic inflammation and may predispose to organ failure. We showed that Mphis pretreated (PreRx) in vitro with low-dose LPSp are "reprogrammed" to release less TNF and more IL-1 in response to subsequent LPS activation (LPSa). The effects of this LPSp "reprogramming" on Mphi cytokine gene transcription were investigated in the present study. Murine peritoneal exudate Mphis were cultured in vitro 48 hr, then PreRx 24 hr +/- 100 ng/ml of LPSp. Cultures were stimulated with 0-1000 ng/ml LPSa and 6-hr supernatant TNF and IL-1 were measured using specific bioassays. Cytokine gene transcription was estimated 6 hr after LPSa using RT-PCR. PreRx with LPSp inhibited TNF and augmented IL-1 release by LPSa. PreRx with LPSp significantly inhibited cytokine gene transcription; however, messages for both TNF and IL-1 were detectable after high-dose LPSa. Despite LPSp inhibition of IL-1 transcription by most LPSa concentrations, IL-1 protein was augmented by PreRx. High-dose LPSa can override LPSp reprogrammed inhibition of cytokine gene transcription, but altered TNF and IL-1 protein release after LPSp may be regulated posttranscriptionally.