ラット副腎髄質におけるアンジオテンシン II 受容体のサブタイプとホスホイノシチド加水分解

アンジオテンシン II (ANG) 受容体のサブタイプは、ラット副腎髄質における ANG アゴニスト [124I]Sar1-ANG とのインキュベーション後の定量的オートラジオグラフィーによって特徴付けられました。ANG 受容体は副腎髄質に高度に局在しています。特異的結合は、AT、受容体遮断薬ロサルタン、AT2 受容体競合薬 CGP 42112A ではそれぞれ 4%、95% 置き換えられました。競合曲線の分析により、CGP 42112A > PD 123319 > PD 123177 の AT2 集団の相対結合能が示されました。ANG は、ラット副腎髄質における +-ノシトールリン酸形成を用量依存的に刺激しました。10(-9) から 10(-5) M の濃度のロサルタンは ANG の効果に拮抗しましたが、PD 123177 または PD 123319 には拮抗作用がありませんでした。しかし、より高濃度 (10(-5) M) の PD 123177 または PD 123319 では、InsP1 蓄積に対する ANG の効果が増強されました。PD 123319 (10(-5) M) ANG の存在下では、ANG 用量反応曲線は左にシフトしましたが、最大効果は変わりませんでした。この影響はロサルタン (10(-5) M) の添加によってブロックされました。逆に、CGP 42112A (10(-6) M) の添加は、ANG による InsP1 蓄積の増加を阻害しました。一方、ANG および CGP 42112A は基礎的な環状 GMP 形成を減少させましたが、この効果はホスホチロシンホスファターゼ阻害剤であるオルトバナジン酸ナトリウムによって部分的に回復しました。我々の結果はさらに、副腎髄質に2つのANG受容体サブタイプが存在することを示している：AT2受容体へのANG結合はイノシトールリン脂質代謝を刺激するのに対し、AT2受容体へのANG結合はイノシトールリン酸産生とcGMP形成の両方を減少させる。

Angiotensin II (ANG) receptor subtypes were characterized by quantitative autoradiography after incubation with the ANG agonist [124I]Sar1-ANG in rat adrenal medulla. ANG receptors are highly localized in adrenal medulla. Specific binding was displaced by 4% and by 95% with the AT, receptor blocker losartan and the AT2 receptor competitor CGP 42112A, respectively. Analysis of competition curves indicated relative binding potencies for the AT2 population of CGP 42112A>PD 123319> PD 123177. ANG stimulated +-nositol phosphate formation in a dose-dependent manner in rat adrenal medulla. Losartan at concentrations of 10(-9) to 10(-5) M antagonized the effect of ANG, whereas PD 123177 or PD 123319 had no antagonistic action. However, at a higher concentration (10(-5) M) PD 123177 or PD 123319 potentiated the effect of ANG on InsP1-accumulation. In the presence of PD 123319 (10(-5) M) ANG dose-response curve was shifted to the left with no change in the maximal effect. This affect was blocked by the addition of losartan (10(-5) M). On the contrary, the addition of CGP 42112A (10(-6) M) inhibited ANG-induced increase in InsP1-accumulation. On the other hand, ANG and CGP 42112A reduced basal cyclic GMP formation, this effect was partially reverted by sodium orthovanadate, a phosphotyrosine phosphatase inhibitor. Our results further demonstrate the presence of two ANG receptor subtypes in adrenal medulla: ANG binding to AT, receptor stimulates inositol phospholipid metabolism, whereas ANG binding to AT2 receptors decreases both inositol phosphate production and cGMP formation.