DNAを標識するための赤外線蛍光DATP

近赤外蛍光は、高感度と低いバックグラウンドでの非放射性検出方法を提供します。赤外線フルオロフォアは、さまざまなタイプのDNA分子の酵素標識の試薬を提供し、自動化されたDNA配列と分析システムでの検出を促進するための試薬を提供するために、ヌクレオチドデオキシアデノシン三リン酸（DATP）に共有結合しています。DNAシーケンス反応産物は、ジデオキシ特異的終端反応の前にアデニンデオキシヌクレオチドの唯一の供給源として赤外線標識DATP（IR-DATP）を利用する限られた重合を実行することにより、内部的に標識できます。PCR産物は、増幅反応に限られた量のIR-DATPを添加することにより、蛍光にラベルを付けることができます。この後者の戦略は、遺伝子マッピング、遺伝診断、法医学分析、および父性検査に役立つ短いタンデムリピート多型（STRP）の検出に利用されています。制限フラグメントは、適切な5 'オーバーハングの充填反応によってもラベル付けできます。このような蛍光標識DNA分子の小量は、赤外線検出技術を使用して迅速かつ便利に視覚化できます。

Near-infrared fluorescence provides a nonradioactive method of detection with high sensitivity and low background. An infrared fluorophore has been attached covalently to the nucleotide deoxyadenosine triphosphate (dATP) to provide a reagent for enzymatic labeling of various types of DNA molecules and for facilitating their detection with an automated DNA sequencing and analysis system. DNA sequencing reaction products can be labeled internally by performing limited polymerization utilizing infrared-labeled dATP (IR-dATP) as the sole source of adenine deoxynucleotide prior to a dideoxy-specific termination reaction. PCR products can be labeled fluorescently by the addition of limited quantities of IR-dATP to the amplification reaction. This latter strategy has been utilized for detection of short tandem repeat polymorphisms (STRPs) which are useful for gene mapping, genetic diagnostics, forensic analysis, and paternity testing. Restriction fragments can be labeled also by fill-in reactions of appropriate 5' overhangs. Diminutive amounts of such fluorescently labeled DNA molecules can be visualized rapidly and conveniently using infrared detection technology.